[发明专利]一种从武夷菌素深层发酵液中提取武夷菌寡糖的工艺方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种从武夷菌素深层发酵液中提取武夷菌寡糖的工艺方法，属 于农用杀菌剂、生长调节剂、植物保护和生物技术领域。

背景技术

目前，化学农药给我们带来大量增产的同时，也给农业带来了很大副作用， 因为化学农药长期大量的应用，造成农业生态环境受到严重污染，同时侵害了 人们的健康。特别是近二十年来，化学农药的长期反复使用或滥用，害虫形成 了一定的抗药性，造成多种农药在防治植物病虫害时出现药效减退，甚至无效 的现象，而植物自身的抗病抗逆机制却逐渐被削弱、钝化、休眠甚至丧失。

国内外研究表明，植物(包括农作物)本身具有遗传的对病虫害的抗逆和免 疫功能，并且植物在长期与病原的共同进化过程中，已产生了一系列对病原物 侵染的防御机制。利用生物或物理、化学因子处理植物，改变植物对病原的反 应，从而获得局部或系统的抗性，称为植物诱导抗病性。可利用植物本身的诱 导抗病性，借助于诱导因子激发植物整体的抗性水平，提高抗病害的能力，而 且诱导因子对人、畜低危险性、环境兼容性好、不会产生抗药性、生产开发费 用低等优点。目前，对于可诱导抗性对植物保护的重大意义，利用此技术来防 治病虫害，已成为可持续农业的重要手段，也是绿色农业生产工作中病 虫害防治的必然选择。

目前发现的诱导子(又称激发子)众多，包括寡糖及其衍生物。寡糖具有 水溶性好；对人畜无害；不污染环境；长期或多次诱导不会使植物产生特异性 抗病性；使用剂量低而且价格与有机农药相近等特点。而且寡糖的植物调节作 用兼有防病和促生长的功能，某些寡糖也是新型的生化肥料。目前寡糖在水果、 蔬菜种植和病害防治上的应用已经取得了明显的效果。随着人们对绿色食品的 需求量日趋增加，寡糖在农业上的市场前景将越来越广阔。

国内外以甲壳素及其降解氨基寡糖已开发若干产品，其中甲壳质(甲壳素) 广泛存在于虾、蟹的外壳、昆虫外皮以及真菌的细胞壁中，能诱导作物 产生多种抗性物质，具有预防、减轻或修复逆境对植物细胞的伤害的作 用，但是甲壳素属于海洋提取物，生产成本高，耗水量极大，对环境污染严重。

中国专利公开的专利号：“200410036011.1”，专利名称：“武夷菌素杀 菌剂的提取浓缩方法”，方法中采用超滤和纳滤的膜技术，既保持了武夷菌素 的活性，又提高了收率并降低了能耗。基于上述专利技术，发明人潍坊万胜生 物农药有限公司在生产过程中发现，武夷菌素发酵液内含有多种复杂的物质， 多为未消耗完的碳源、葡萄糖、淀粉粒、胶状物质等较大的颗粒，也有在产生 抗生素之前形成的多糖、多肽成分，其分子量在2500-4000之间，属于大分量， 而武夷菌素的分子量仅在300左右，属于小分子量。

发明内容

本发明要解决的问题是提供一种从武夷菌素深层发酵液中提取武夷菌寡糖 的工艺方法，是在武夷菌素杀菌剂生产过程中，采用一次深层发酵，生产武夷 菌寡糖和2％武夷菌素杀菌剂两种生物产品，具有工艺简单，生产成本低的优点。

为了解决上述问题，本发明的技术方案为：

一种从武夷菌素深层发酵液中提取武夷菌寡糖的工艺方法，由制发酵液、过 滤、提取、稀释、过滤、浸泡处理、制寡糖等工序组成。

本发明的一种从武夷菌素深层发酵液中提取武夷菌寡糖的工艺方法，包括 以下步骤：

(1)制发酵液工序：深层发酵罐中，分别投入武夷菌素菌种和营养基，温 度控制在30-35℃，深层发酵60-65小时，制得发酵料液；

(2)过滤工序：将发酵料液，经板框压滤机进行过滤，去除发酵液中的发 酵菌丝体和部分未利用的营养基残渣，过滤后转入待处理液槽，再经料泵进入 精滤器中，截取板框过滤漏掉的一部分较大的发酵液颗粒，转入超滤器中；

(3)提取工序：经超滤器，在常温下，过滤出分子量为2500-4000的胞外 多糖、多肽料液，剩余滤液转入纳滤器；

(4)稀释、过滤工序：将步骤(3)滤出的胞外多糖、多肽料液再经循环过 滤储罐排入酶处理罐，当胞外多糖、多肽料液排入到酶处理罐1/3处时，停止 倒入，再加入2/3的水稀释；

(5)浸泡处理工序：加水稀释后，温度控制32-34℃，浸泡20-25小时后， 然后缓慢升温，升温至85-95℃，再自然冷却至32-34℃，制得浸泡液；