[发明专利]一种杂交瘤细胞株及其产生的抗氯霉素单克隆抗体

权利要求书

1.一种产生抗氯霉素单克隆抗体的杂交瘤细胞株7C10，其保藏号为CGMCCNo.3574。

2.一种由权利要求1的杂交瘤细胞株7C10分泌的抗氯霉素单克隆抗体7C10’。

3.一种权利要求1的氯霉素单克隆抗体7C10’的制备方法，其特征是包括以下步骤：

a.制备免疫原和包被原：

氯霉素用碳二亚胺盐酸盐活化，然后将活化的氯霉素与载体蛋白偶联得免疫原和包被原；

b.动物免疫注射：

以Balb/c小鼠作为免疫动物，腹腔注射免疫原并加强免疫；

c.筛选免疫小鼠血清：

检测加强免疫后的Balb/c小鼠血清抗体效价，筛选出血清效价高的小鼠进行加强免疫；

d.制备杂交瘤细胞：

取经过加强免疫的小鼠的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合，经过至少2次亚克隆，获得稳定分泌抗氯霉素的单克隆抗体杂交瘤细胞株7C10；

e.制备并纯化单克隆抗体7C10’：

用杂交瘤细胞7C10对小鼠进行腹腔注射，采集腹水并通过液相层析纯化获得抗氯霉素单克隆抗体7C10’。

4.根据权利要求3所述的抗氯霉素单克隆抗体的制备方法，其特征是所说的步骤a中，以牛血清白蛋白或人血清白蛋白为载体蛋白，与氯霉素偶联反应分别得免疫原CAP-BSA或CAP-HAS；以卵清白蛋白为载体蛋白，与氯霉素偶联反应得包被原CAP-OVA。

5.根据权利要求3所述的氯霉素单克隆抗体的制备方法，其特征是所说的步骤a中，碳二亚胺盐酸盐活化氯霉素的反应时间小于20min，氯霉素与载体蛋白偶联反应时间至少为10小时。

6.根据权利要求3所述的抗氯霉素单克隆抗体的制备方法，其特征是所说的步骤b中，每次免疫注射剂量至少为50μg/只小鼠。

7.权利要求2的抗氯霉素单克隆抗体7C10’应用于氯霉素残留的定性或定量检测。