[发明专利]一种利用啤酒麦糟制备多肽的方法

权利要求书

1.一种利用啤酒麦糟制备多肽的方法，其特征在于包括以下操作步骤：

(1)将湿啤酒糟进行干燥、粉碎和过筛，得到啤酒糟；每100g啤酒糟加 入1000～4000mL抽提剂，室温下搅拌，过滤去渣，离心，得到蛋白提取液； 将所得蛋白提取液调节pH4.0～5.0进行沉淀，去上清液，真空冷冻干燥，得到 粗多肽；

(2)在步骤(1)所得粗多肽中加入磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液，调节pH 值至6.5～8.5；再加入Alcalase碱性蛋白酶，加热至45～65℃，在振荡条件下 水解1～5h，得到水解液；所述磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液的加入量为每克啤 酒糟粗蛋白加入10～30mL，所述Alcalase碱性蛋白酶的加入量为每克啤酒糟粗 蛋白加入0.1～0.25mL；

(3)将步骤(2)所得水解液于沸水浴灭酶2～6min，离心，得到多肽液；

(4)取步骤(3)所得多肽液用凝胶柱分离，分别收集各峰后合并，浓缩， 冷冻干燥，得到活性多肽；

步骤(1)所述抽提剂为乙醇-氢氧化钠混合液；所述乙醇-氢氧化钠混合液 为体积比为1∶2的乙醇和氢氧化钠混合而成，所述乙醇的体积百分比浓度为 70％～95％；所述氢氧化钠的摩尔浓度为0.01～0.10mol/L；

步骤(4)所述凝胶柱为Sephadex G15凝胶柱或Sephadex G25凝胶柱；所 述多肽液的上样量是5～10ml，洗脱液为蒸馏水，流速2.0～4.0mL/min。

2.根据权利要求1所述的一种利用啤酒麦糟制备多肽的方法，其特征在于： 步骤(1)所述干燥为冷冻干燥；所述粉碎为采用万能粉碎机进行粉碎；所述过 筛为过100目筛；所述搅拌的时间为60～120min。

3.根据权利要求2所述的一种利用啤酒麦糟制备多肽的方法，其特征在于： 步骤(1)所述搅拌的时间为70min。

4.根据权利要求1所述的一种利用啤酒麦糟制备多肽的方法，其特征在于： 步骤(1)所述调节pH是采用摩尔浓度为0.2mol/L的柠檬酸调节至4.5～5.0。

5.根据权利要求1所述的一种利用啤酒麦糟制备多肽的方法，其特征在于： 步骤(2)所述磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液的加入量为每克啤酒糟粗蛋白加入 15mL，所述调节pH值是调节至8.0，所述Alcalase碱性蛋白酶的加入量为每克 啤酒糟粗蛋白加入0.15mL；所述加热为加热至50℃；所述水解的时间为2h。

6.根据权利要求1所述的一种利用啤酒麦糟制备多肽的方法，其特征在于： 步骤(3)所述离心的转速为2000～6000rpm，时间为10～30min。

7.一种多肽，是根据权利要求1～6任一项所述方法制备得到的。

8.权利要求7所述的多肽在制备降血糖药物中的应用。