[发明专利]一种利用啤酒麦糟制备多肽的方法

说明书

技术领域

本方法属于食品和保健领域，特别涉及一种利用啤酒麦糟制备多肽的方 法。

背景技术

啤酒糟是啤酒酿造生产的主要废弃物之一。据估计2010年我国的啤酒 产量将达到3000万吨/年，啤酒糟产量也将达到750万吨/年(湿糟)。据测 定，其蛋白质含量为23％～30％(干基)，可见啤酒糟是一种很好的蛋白质 资源。长期以来，大多数厂家主要是将湿糟作为粗饲料直接低价出售，其收 益甚微；有少数厂家则是将啤酒糟直接排放，不仅造成严重的环境污染，还 导致资源的浪费。因此开发综合利用啤酒糟成为研究人员的重要任务。

生物活性肽是指具有特殊生理活性的肽类，其消化吸收性能强于氨基 酸，其营养和生理效果更为优越，不仅易于消化吸收，还具有抗过敏性，降 低胆固醇、血压，增强免疫力等诸多生理功能。近年来，生物活性多肽以其 独具的生理活性强、免疫原性低、疗效高等诸多优点，在人类疾病治疗中的 地位日趋重要，目前已成为国际研究的热点之一。因此，以啤酒糟为原料， 开发制备具有生物活性的多肽，将大大提高啤酒糟的利用率，以此为基础生 产高附加值的产品，更会为市场注入广大的利润空间。

开发利用啤酒糟的研究早有报道，大部分的研究仅限于利用啤酒糟生产 动物饲料，只有少数报导有关于啤酒糟的综合利用，如日本麒麟株式会社开 发出从啤酒糟中制取高蛋白的方法；专利文献“啤酒糟生产的生物蛋白”，以 啤酒糟为原料，制备出高质量的生物蛋白，但都并未延伸到多肽及其生物活 性方面。目前，对天然多肽的生物活性的研究日益增多，但对来源丰富的啤 酒糟多肽的制备及活性研究并未见报道。

发明内容

为了解决上述现有技术的不足之处，本发明的首要目的在于提供一种利 用啤酒麦糟制备多肽的方法。

本发明的又一目的在于提供一种上述方法制备的活性多肽，该多肽具有 较高的抑制α-葡萄糖苷酶即降血糖活性。

本发明的再一目的在于提供上述活性多肽的应用。

本发明的目的通过下述技术方案实现：一种利用啤酒麦糟制备多肽的方 法，包括以下操作步骤：

(1)将湿啤酒糟进行干燥、粉碎和过筛，得到啤酒糟；每100g啤酒糟 加入1000～4000mL抽提剂，室温下搅拌，过滤去渣，离心，得到蛋白提取 液；将所得蛋白提取液调节pH4.0～5.0进行沉淀，去上清液，真空冷冻干燥， 得到粗多肽；

(2)在步骤(1)所得粗多肽中加入磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液，调 节pH值至6.5～8.5；再加入Alcalase碱性蛋白酶，加热至45～65℃，在振 荡条件下水解1～5h，得到水解液；所述磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液的加入 量为10～30mL每克啤酒糟粗蛋白，所述Alcalase碱性蛋白酶的加入量为 0.1～0.25mL每克啤酒糟粗蛋白；

(3)将步骤(2)所得水解液于沸水浴灭酶2～6min，离心，得到多肽 液；

(4)取步骤(3)所得多肽液用凝胶柱分离，分别收集各峰后合并，浓 缩，冷冻干燥，得到活性多肽。

步骤(1)所述干燥为冷冻干燥；所述粉碎为采用万能粉碎机进行粉碎； 所述过筛为过100目筛；所述搅拌的时间为60～120min。

步骤(1)所述搅拌的时间为70min。

步骤(1)所述调节pH是采用摩尔浓度为0.2mol/L的柠檬酸调节至4.5～ 5.0。

步骤(1)所述抽提剂为乙醇-氢氧化钠混合液或碳酸钠-碳酸氢钠缓冲溶 液；所述乙醇-氢氧化钠混合液为体积比为1∶2的乙醇和氢氧化钠混合而成， 所述乙醇的体积百分比浓度为70％～95％；所述氢氧化钠的摩尔浓度为 0.01～0.10mol/L；所述碳酸钠-碳酸氢钠缓冲溶液的pH值为8.0～11.0。

步骤(2)所述磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲溶液的加入量为15mL每克啤酒 糟粗蛋白，所述调节pH值是调节至8.0，所述Alcalase碱性蛋白酶的加入量 为0.15mL每克啤酒糟粗蛋白；所述加热为加热至50℃；所述水解的时间为 2h。

步骤(3)所述离心的转速为2000～6000rpm，时间为10～30min。

步骤(4)所述凝胶柱为Sephadex G15凝胶柱或Sephadex G25凝胶柱； 所述取上清液的上样量是5～10ml，洗脱液为蒸馏水，流速2.0～4.0mL/min。

一种活性多肽，是根据上述方法制备的。