[发明专利]一种原虫样本的染色方法有效
申请号: | 201010022637.2 | 申请日: | 2010-01-11 |
公开(公告)号: | CN101897328A | 公开(公告)日: | 2010-12-01 |
发明(设计)人: | 郭俭;陈家旭;陈韶红;田利光;蔡玉春;张永年;李浩;童小妹 | 申请(专利权)人: | 中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所 |
主分类号: | A01N1/00 | 分类号: | A01N1/00;G09B23/36 |
代理公司: | 上海世贸专利代理有限责任公司 31128 | 代理人: | 严新德 |
地址: | 200025 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 原虫 样本 染色 方法 | ||
1.一种原虫样本的染色方法,其特征在于:包括一个配制溶液的步骤,所述的溶液包括聚乙烯醇固定液、三色染液和Masson三色染液,包括一个制作刮片标本的步骤,在所述的制作刮片标本的步骤中,首先在固定液中加入冰醋酸,搅拌混匀,然后将粪样加入固定液,搅拌混匀,吸干固定液,将粪渣刮至载玻片上保存,还包括一个染色的步骤,首先将粪便刮片放入乙醇中清洗,将粪便刮片放在三色染液中染色,吸干染色液后,在添加有冰醋酸的乙醇中清洗,吸干后,将粪便刮片放入Weigert氏铁苏木素染液,水洗,然后采用盐酸酒精分化,再用丽春红酸性品红染液染5-10分钟,水洗,再用磷钼酸溶液处理,吸干后用苯胺蓝染液复染5-10分钟,再用冰醋酸处理、酒精脱水、二甲苯透明处理和中性树胶封固。
2.如权利要求1所述的一种原虫样本的染色方法,其特征在于:所述的聚乙烯醇固定液通过如下步骤配制,
a)配制硫酸铜水溶液,硫酸铜水溶液的质量百分比浓度在15-20%之间;
b)在上述的硫酸铜水溶液中加入聚乙烯醇,充分溶解,聚乙烯醇的加入量为硫酸铜水溶液的质量的1%-1.2%,然后在其中加入占硫酸铜水溶液的体积50-70%的90-99%质量百分比浓度的乙醇,充分混匀;
c)使用前以硫酸铜水溶液计算,按照10∶0.8-1.2的比例加入冰醋酸。
3.如权利要求1所述的一种原虫样本的染色方法,其特征在于所述的三色染液通过如下步骤配制:首先配制一个三色基础液,所述的三色基础液由变色酸2R、亮绿、磷钨酸和水组成,所述的变色酸2R占所述的三色染液的重量百分比为0.5-0.7%,所述的亮绿占所述的三色染液的重量百分比为0.2-0.4%,所述的磷钨酸占所述的三色染液的重量百分比为0.6-0.8%,余量为水,然后在三色基础液中加入冰醋酸,所述的冰醋酸的加入量为所述的三色基础液的体积的0.8-1.2%。
4.如权利要求1所述的一种原虫样本的染色方法,其特征在于:所述的Masson三色染色液通过如下步骤配制,
1)配制Weigert氏铁苏木素染液:
A液:配制苏木素酒精溶液,使得苏木素在酒精中的质量百分比浓度为0.8%-1.2%;
B液:将重量百分比浓度为25-35%的三氯化铁水溶液加入水中,三氯化铁水溶液占B液的体积百分比为3-5%,然后在水中加入质量百分比浓度为25-40%的浓盐酸,浓盐酸占B液的体积百分比为0.8-1.2%;
使用前取A液与B液等量混合即可;
2)配制丽春红酸性品红溶液:
所述的丽春红酸性品红溶液由丽春红、酸性品红、冰醋酸和水组成,在配制丽春红酸性品红溶液的的步骤中,包括一个配制丽春红酸性品红基础溶液的步骤,在丽春红酸性品红基础溶液中,丽春红占丽春红酸性品红基础溶液的质量百分比为0.5-0.9%,所述的酸性品红占丽春红酸性品红基础溶液的质量百分比为0.2-0.4%,余量为水,然后在丽春红酸性品红基础溶液中加入冰醋酸,所述的冰醋酸的加入量为丽春红酸性品红溶液体积的0.8-1.2%;
3)配制磷钼酸水溶液:
所述的磷钼酸水溶液由水和磷钼酸组成,其中磷钼酸在水溶液的质量百分比为0.8-1.2%,余量为水;
4)配制苯胺蓝溶液:
所述的苯胺蓝溶液由苯胺蓝、冰醋酸和水组成,在配制所述的苯胺蓝溶液的过程中,包括一个配制苯胺蓝基础溶液的步骤,在苯胺蓝基础溶液中,苯胺蓝占苯胺蓝基础溶液的质量百分比浓度为1.8-2.2%,余量为水,然后在苯胺蓝基础溶液中加入冰醋酸,冰醋酸的加入量为苯胺蓝溶液的体积的1.8-2.2%。
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