[发明专利]乳胶增强免疫比浊法测定尿液转铁蛋白试剂盒及其制备方法

权利要求书

1.一种乳胶增强免疫比浊法测定尿液转铁蛋白试剂盒，其特征在于，所述试剂盒的包括乳胶粒子、转铁蛋白抗体和缓冲液；转铁蛋白抗体和乳胶粒子共价结合的合适途径，建立低浓度转铁蛋白水平下和已结合乳胶粒子的转铁蛋白抗体反应形成在340nm-700nm检测的浊度反应体系。

2.一种乳胶增强免疫比浊法测定尿液转铁蛋白试剂盒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)、乳胶粒子的活化

①取1000μl兔抗人转铁蛋白抗体加入2000μl 20mM磷酸缓冲液，pH7.50，混匀备用；

②取600μl 10％20-40nm乳胶粒子，离心4℃21000rpm 90min，弃去滤液；

③加入1000μl 10mM磷酸缓冲液，pH6.00用超声清洗剂溶解粒子，离心清洗两次；

④用3000μl 10mM磷酸缓冲液，pH6.00溶解乳胶粒子，使乳胶粒子活化浓度为2％；加入0.036g N-羟基琥珀酰亚胺，使反应浓度达到12mg/ml；0.060g1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐，使反应浓度达到20mg/ml；

⑤室温振荡15min；

⑥4℃高速离心60min，弃去滤液；

⑦用3000μl 2mM盐酸冰浴溶解乳胶粒子，4℃高速离心清洗90min，立刻用于结合；

(2)、转铁蛋白抗体和乳胶粒子的结合

①加入兔抗人转铁蛋白抗体缓冲液，使乳胶粒子结合浓度为2％；

②室温振荡2hr；

③4℃高速离心60min，分离滤液，保存滤液；

④用3000μl 20mM磷酸缓冲液，pH7.50，溶解乳胶粒子，高速离心清洗，制成保存溶液，立刻用于保存；

(3)、保存

①加入3000μl保存溶液，pH7.50溶解乳胶粒子，使乳胶粒子保存浓度为2％；

②混匀，4℃保存，用于稳定。

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述高速离心是21000rpm离心。

4.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，其中，所述室温振荡的频率为2000次/分钟。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，其中，所述室温是指温度不高于30℃。