[发明专利]一种利用RNA干扰技术培育抗虫性提高的转基因植物的方法及其专用DNA片段有效
| 申请号： | 201010034319.8 | 申请日： | 2010-01-15 |
| 公开（公告）号： | CN101851622A | 公开（公告）日： | 2010-10-06 |
| 发明（设计）人： | 方荣祥;陈晓英;郭红艳 | 申请（专利权）人： | 中国科学院微生物研究所 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/82 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 关畅;任凤华 |
| 地址： | 100101 北京市朝阳区*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 利用 rna 干扰 技术 培育 抗虫性 提高 转基因 植物 方法 及其 专用 dna 片段 | ||
1.一个DNA片段，是式I所示的基因片段：
SEQ正向-X-SEQ反向
(I)
其中，SEQ正向是ATP合酶E亚基基因的全长cDNA片段中的至少包括19bp的任何一段；
SEQ反向与所述SEQ正向反向互补；
X是SEQ正向与SEQ反向之间的间隔序列，X与所述SEQ正向或者X与SEQ反向均不互补；
所述ATP合酶E亚基基因的全长cDNA如序列表中序列1所示。
2.根据权利要求1所述的DNA片段，其特征在于：所述SEQ正向的核苷酸序列如序列表中序列2所示。
3.根据权利要求1或2所述的DNA片段，其特征在于：所述X是内含子，所述内含子的核苷酸序列如序列表中序列3所示。
4.含有权利要求1-3任一所述DNA片段的重组载体。
5.根据权利要求4所述的重组载体，其特征在于：所述重组载体是通过如下方法构建的重组表达载体：
将序列表中序列2所示的DNA片段插入pIPK的EcoRI和KpnI酶切位点之间构成中间质粒；
将将序列表中序列2所示的DNA片段反向插入所述中间质粒的XbaI和BamHI酶切位点之间，构成重组表达载体。
6.ATP合酶E亚基基因作为RNA干扰靶基因在培育抗虫性提高的转基因植物中的应用。
7.一种培育抗虫性提高的转基因植物的方法，是将权利要求1-3任一所述的DNA片段导入目的植物中得到转基因植物；所述转基因植物的抗虫性高于所述目的植物。
8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于：权利要求1-3任一所述的DNA片段是通过权利要求4或5所述的重组表达载体导入目的植物中的。
9.根据权利要求7或8所述的方法，其特征在于：所述抗虫是指抗蚜总科的蚜虫，所述蚜总科的蚜虫优选是蚜科(Aphididae)的蚜虫，更优选是桃蚜(Myzuspersicae)。
10.根据权利要求7-9任一所述的方法，其特征在于：所述植物为任何可以被蚜总科的蚜虫感染并且含有蚜虫ATP合酶E亚基基因的植物，优选是烟草。
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