[发明专利]一种高效生产纤维素酶的方法

权利要求书

1.一种高效生产纤维素酶的方法，包括以下步骤：

将里氏木霉(Trichoderma reesei)接种至发酵培养基中，发酵60～90小 时后开始流加培养，流加培养过程中，当发酵液pH值高于4.8时，流加 培养基，当发酵液pH值低于4.5时，停止流加培养基，总发酵时间达到 192～240小时，停止发酵；

所述的发酵培养基配方为：

可溶性碳源10～25g/L、不溶性碳源20～35g/L、硫酸镁0.5～1.0g/L、 磷酸二氢钾4～8g/L、土温80 1～4g/L、酵母粉15～20g/L，蛋白胨10～ 15g/L、硫酸铵2～4g/L、氯化钙0.2～0.8g/L、FeSO₄·7H₂O 3～7mg/L、 ZnSO₄·7H₂O 1～2mg/L，MnSO₄·H₂O 1～2mg/L、CoCl₂·6H₂O 3～4mg/L、钼酸 铵1～2mg/L、H₃BO₃ 0.2～0.6mg/L；

流加培养过程中流加的培养基配方为：

可溶性碳源100～250g/L、不溶性碳源20～40g/L、硫酸镁3～4g/L、 磷酸二氢钾18～26g/L、土温801～4g/L、酵母粉60～80g/L、蛋白胨40～ 60g/L、硫酸铵10～15g/L、氯化钙1.5～2.5g/L、FeSO₄·7H₂O 15～25mg/L、 ZnSO₄·7H₂O 5～6mg/L、MnSO₄·H₂O 6～7mg/L、CoCl₂·6H₂O 12～16mg/L、 钼酸铵4～8mg/L、H₃BO₃ 1～3mg/L。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的发酵温度为： 流加培养之前30～32℃，流加培养开始后28～30℃；发酵通风量为：流 加培养之前0.8～1.4vvm，流加培养开始后0.5～0.8vvm。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的可溶性碳源由 重量百分比为87～94％的葡萄糖和6～13％的槐糖组成。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的不溶性碳源为 纤维素粉、纸浆和经过蒸汽爆破的植物纤维素原料中的至少一种。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的里氏木霉的菌 种保藏号为ATCC56764。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的流加培养过程 中，培养基的流加速率为0.83～8.3L/h·m³发酵液。