[发明专利]一种嗜盐纤维素酶及其编码基因与应用

权利要求书

1.一种蛋白质，是如下(a)、(b)或(c)所示的蛋白质：

(a)由序列表中序列1中自N端起第34-569位氨基酸残基所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

(b)由序列表中序列1所示的氨基酸序列组成的蛋白质；

(c)将(a)或(b)所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有纤维素酶活性的由(a)或(b)衍生的蛋白质。

2.权利要求1所述蛋白质的编码基因。

3.根据权利要求2所述的编码基因，其特征在于：所述编码基因是如下1)或2)或3)或4)的DNA分子：

1)核苷酸序列是序列表中序列2自5′末端起第100至1710位核苷酸所示的DNA分子；

2)核苷酸序列是序列表中序列2所示的DNA分子；

3)在严格条件下与1)或2)限定的DNA序列杂交且编码具有纤维素酶活性的蛋白的DNA分子；

4)与1)或2)或3)限定的DNA序列具有90％以上同源性，且编码具有纤维素酶活性的蛋白的DNA分子。

4.含有权利要求2或3所述编码基因的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌。

5.根据权利要求4所述的重组载体，其特征在于：所述重组载体为将权利要求2或3所述编码基因插入出发载体pET28a的多克隆位点得到的重组表达载体；所述重组菌是将权利要求2或3所述编码基因插入出发载体pET28a的多克隆位点得到的重组表达载体转化大肠杆菌Rosetta(DE3)得到的。

6.一种制备权利要求1所述蛋白的方法，是培养权利要求5所述的重组菌，得到所述蛋白质。

7.扩增权利要求2或3所述编码基因的全长及其任意片段的引物对。

8.根据权利要求7所述的引物对，其特征在于：所述引物对中的一条引物序列如序列表中序列3所示，另一条引物序列如序列表中序列4所示。

9.权利要求1所述蛋白质在降解纤维素中的应用；权利要求2或3所述编码基因在降解纤维素中的应用；权利要求4或5所述重组载体在降解纤维素中的应用；权利要求4或5所述重组菌在降解纤维素中的应用；权利要求4所述表达盒在降解纤维素中的应用；或权利要求4所述转基因细胞系在降解纤维素中的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于：所述纤维素为羧甲基纤维素；所述降解的条件包括：反应体系的温度为20-70℃，优选为55℃，反应体系的pH值为4-10，优选为5.5；反应体系中盐浓度为如下1)或2)所示：1)所述盐为NaCl，反应体系中盐浓度为0.25-4M，优选为2.5M；2)所述盐为KCl，反应体系中盐浓度为0.25-3.5M，优选为3M。