[发明专利]铁皮石斛原球茎的间歇式发酵培养方法

权利要求书

1.铁皮石斛原球茎间歇式发酵培养研究，其特征包括：培养基的配置，培养容器的选择，培养基的灭菌，培养物的诱导，培养物的筛选，培养物的培养，培养物的继代，培养物的收集。

2.根据权利要求1所述的所述的铁皮石斛原球茎的间歇式发酵培养研究过程主要包括以下几个特征：

(1)：培养基的配置，所用培养基为大量减半的基本MS液体培养基加入0～1.0的生长素并加入100g/L的香蕉汁，其中蔗糖的浓度为20～40g/L；

(2)：培养用的反应器为间歇式生物反应器，其特征为培养物在培养过程中不是一直浸泡在液体培养基中，而是浸泡与非浸泡过程交替进行，这种交替的实现是通过每天向培养容器中通入液体培养基3～24次，每次1～10min的方式实现的。

(3)配置好的培养基密封好后，采用高压蒸汽的方式进行灭菌，灭菌时间为15-30min；

(4)培养物的诱导材料为铁皮石斛茎段或种子，诱导时采用固态培养基，进行诱导所用的培养基为大量减半的基本MS培养基加入0～1.0的生长素，100g/L的香蕉汁，20～40g/L的蔗糖，(4.0～8.0)g/L的琼脂；

(5)用于间歇式发酵培养的原球茎为固态培养基中诱导得到的培养物中生长速度快，芽点较大，芽数较少的铁皮石斛原球茎。

(6)原球茎的培养方式为间歇式发酵培养，培养温度为23～17℃。光照时间为6～18h/d；每隔20～60天更换培养基一次。

(7)培养物的收集，培养好的培养物即可进行收集，收集时直接从反应器中倒出即可。

(8)收集得到的铁皮石斛原球茎可以作为野生或人工种植的铁皮石斛药材的替代品使用。