[发明专利]一种利用腋芽增殖试管快繁地灵的方法

权利要求书

1.一种利用腋芽增殖试管快繁地灵的方法，其特征在于，包括下列步 骤：

1)休眠芽发育诱导培养：在地灵收获期，选取大田栽培、生长健壮、 单株产量高的地灵单株的地下根茎，经充分水洗后用质量分数为75％的乙醇 消毒30秒，用每升含有0.1％的汞消毒10分钟，于无菌条件下切成带休眠 芽的茎段，接种到地灵休眠芽发育诱导培养基上，于25℃～27℃温度、 3000Lx光照条件下诱导地灵地下根茎休眠芽发育；

所述的地灵休眠芽发育诱导培养基以通用培养基MS为基础，附加2.0 mg/L的6-呋喃基氨基嘌呤；

调整休眠芽发育诱导培养基的pH值为5.6，置压力为1.0kg/cm²的高 压灭菌锅灭菌15分钟；

2)腋芽增殖培养：当休眠芽发育诱导培养基上的地灵根茎休眠芽发育 到3～4片叶时，切下幼苗接种到地灵腋芽发育增殖培养基中，于温度25℃～ 27℃、3000Lx光照条件下诱导地灵无菌苗腋芽发育增殖；

所述的腋芽增殖培养基以通用培养基MS为基础，附加2.0mg/L的6- 呋喃基氨基嘌呤(KT)和0.5mg/L的吲哚乙酸(IAA)；

调整腋芽增殖培养基的pH值为5.6，置压力为1.0kg/cm²的高压灭菌 锅灭菌15分钟；无菌苗经过腋芽增殖培养，一个无菌苗增殖到4～5个苗或 枝条；

3)芽苗再增殖：切取腋芽增殖培养基上的单个枝条，接种到同一腋芽 增殖培养基上，在同样培养条件下诱导腋芽发育再增殖；

腋芽发育增殖进行多次，每次为一代，根据增殖起始苗数、有效繁殖系 数和年生产规模确定增殖代数；

4)壮苗生根培养：地灵腋芽发育增殖每一代的试管苗和增殖培养结束 后所有试管苗，切下单个芽苗转入壮苗生根培养基中，于25℃条件下连续 光照培养18天进行壮苗生根；

壮苗生根培养基以通用培养基MS为基础，将MS通用培养基的无机盐浓 度降低一半，并附加0.5mg/L的α-萘乙酸(NAA)；

调整壮苗生根培养基的pH值为5.6，置压力为1.0kg/cm²的高压灭菌 锅灭菌15分钟；

5)炼苗和缓苗：试管苗生根壮苗培养18天后，向培养瓶中加少量无菌 自来水，于10～18℃遮阴条件下炼苗3～6天，然后取出试管苗，洗净根部 琼脂，移栽于含30％沙子的沙质土壤营养钵中，置于10～18℃遮阴条件下缓 苗10～15天；

6)起窝和栽种：地灵大田定植每亩按3000～5000株起窝，每窝浇足水， 将去掉营养钵的地灵苗连同介质直接栽入并覆土、浇水；

7)地灵大田定植缓苗后，按常规方法管理。