[发明专利]一种利用腋芽增殖试管快繁地灵的方法

说明书

技术领域

本发明属于保健植物的试管快繁技术，具体涉及一种利用腋芽增殖试管 快繁地灵的方法。

背景技术

地灵(Stachys floridana)，又称银条，是唇形科水苏属多年生蓄根草 本植物，主要产于我国西北、华北等地，生长于水位较高的沙土荒地、田间 及草丛湿地，目前在我国西北地区的甘肃、宁夏、新疆、陕西延安、榆林以 及河北、内蒙、东北等地有一定分布，处于半野生状态。地灵作为蔬菜人工 栽培面积很小，地灵含有丰富的水苏糖；水苏糖属于低聚半乳糖，是一种能 显著促进双歧杆菌增殖的功能性低聚糖，故被誉为“超强双歧因子”低聚糖。 作为双歧因子的一种，水苏糖对人体胃肠道内的双歧杆菌、乳酸杆菌等有益 菌群有着极明显的增殖作用，能迅速改善人体消化道内环境，调节微生态平 衡。通过获得大量增殖的双歧杆菌、乳酸杆菌，促进形成有益菌在消化道内 的优势菌地位。双歧杆菌等有益菌具有能清除自由基及过氧化脂质的能力， 抑制产气产酸梭状芽孢杆菌等腐败菌的生产，因而能够延缓细胞的衰老，另 外产生大量生理活性物质，调节肠道pH值、灭杀致病菌，阻遏腐败产物生 成，抑制内源致癌物的产生和吸收，起到延年益寿的作用，除此，双歧杆菌 能非特异性地提高机体的免疫力，提高抗感染的能力，也有利于健康和长寿。 地灵作为我国水苏糖生产的主要原料，和我国水苏糖产业的发展是紧密相关 联的，我国近几年水苏糖产业的飞速发展，要求地灵的生产在产量和质量上 要同步跟进。但由于地灵是通过播种地下茎进行无性繁殖的植物，像马铃薯 这些无性繁殖作物一样，种性退化是其栽培的主要问题，近几年我国地灵由 半野生的零星栽培到规模化的人工无性繁殖栽培，使地灵不同程度病毒累 积、种性退化、成片死亡的问题日益凸现，给大规模生产带来了极大风险； 同时地灵通过播种地下茎进行无性繁殖，繁殖系数很低，种源严重匮乏，这 些都成为制约地灵大规模生产的瓶颈，因此加大地灵的生产规模，保证地灵 的安全生产，提高地灵根茎生产量已经成为当前我国特有野生资源地灵栽培 和水苏糖产业开发的当务之急。

发明内容

针对上述现有技术存在的问题或不足，申请人进行了地灵腋芽发育试管 克隆繁育的技术开发研究，经过实验研究和技术的集成优化，提出一种利用 腋芽增殖试管快繁地灵的方法。该方法利用植物克隆繁育技术，进行工厂化、 规模化的地灵克隆繁育，克服了传统地灵利用根茎繁殖用种量大、繁殖效率 低及多代无性繁殖种性退化严重、产量、品质下降等弊端，大幅度的提高地 灵繁殖速度和繁殖效率，加快地灵产业的发展，保证地灵种性和生产潜力， 大幅度的提高地灵的产量与品质。

为实现上述任务，本发明采取如下的技术解决方案：

一种利用腋芽增殖试管快繁地灵的方法，包括下列步骤：

1)休眠芽发育诱导培养：在地灵收获期，选取大田栽培、生长健壮、 单株产量高的地灵单株地下根茎，经充分水洗后用质量分数为75％的乙醇消 毒30秒，用每升含有0.1％的汞消毒10分钟，于无菌条件下切成带休眠芽 的茎段，接种到休眠芽发育诱导培养基上，于25℃～27℃温度、3000Lx光 照条件下诱导地灵地下根茎休眠芽发育；

所述地灵休眠芽发育诱导培养基以通用培养基MS为基础，附加2.0 mg/L的6-呋喃基氨基嘌呤；

调整休眠芽发育诱导培养基的pH值为5.6，置高压灭菌锅(压力：1.0kg /cm²)灭菌15分钟。

2)腋芽增殖培养：当休眠芽发育诱导培养基上的地灵根茎休眠芽发育 到3～4片叶时，切下幼苗接种到地灵腋芽发育增殖培养基中，于温度25℃～ 27℃、3000Lx光照条件下诱导地灵无菌苗腋芽发育增殖；

所述的腋芽增殖培养基以通用培养基MS为基础，附加2.0mg/L的6- 呋喃基氨基嘌呤(KT)和0.5mg/L的吲哚乙酸(IAA)；

调整腋芽增殖培养基的pH值为5.6，置高压灭菌锅(压力：1.0kg/cm²) 灭菌15分钟；无菌苗经过腋芽增殖培养，一个无菌苗增殖到4～5个苗或枝 条；

3)芽苗再增殖：切取腋芽增殖培养基上的单个枝条，接种到同一腋芽 增殖培养基上，在同样培养条件下诱导腋芽发育再增殖；

腋芽发育增殖进行多次，每次为一代，根据增殖起始苗数、有效繁殖系 数和年生产规模确定增殖代数；