[发明专利]高纯度栀子苷的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体涉及一种从栀子果实中提取纯化制备高纯度栀子苷的方法。

背景技术

栀子为茜草科植物栀子Gardenia jasminoides Ellis.的干燥成熟果实。9-11月果实成熟呈红黄色时采收。除去果梗及杂质，蒸至上汽或置沸水中略烫，取出，干燥[国家药典委员会.中华人民共和国药典(2005年版一部)[S].北京：化学工业出版社，2005：173]。性味苦寒，入心、肝、肺、胃、三焦，具有泻火除烦、清热利湿、凉血解毒、消肿止痛之功效。

栀子中含有大量的环烯醚萜甙类化合物[王钢力，陈德昌，赵淑杰.栀子属植物化学成分研究进展[J].中国中药杂志，1996，21(2)：67-72]，包括京尼平苷、羟异栀子苷、京尼平龙胆二糖苷、山栀子苷、栀子酮苷、鸡屎藤次苷甲酯、车叶草苷、脱乙酰基车叶草苷酸、脱乙酰基车叶草苷酸甲酯、栀子酸(京尼平苷酸)、香豆酰京尼平龙胆双糖苷；有机酸类成分，包括绿原酸、熊果酸、苦臧红花酸；黄酮类成分：栀子素A、栀子素B、栀子素C、栀子素D、栀子素E、3，4，5-三甲氧基汉黄芩素、3，4-二甲氧基汉黄芩素、4-二羟基汉黄芩素、3，4-二羟基汉黄芩素、3，4，5-三羟基汉黄芩素、5，7，3，4-四羟基-6，8-二甲氧基黄酮等黄酮类化合物。栀子苷(geniposide)是主要的环烯醚萜苷化合物，是栀子中的主要化学成分，药理学研究显示栀子苷及其代谢物具有：对肝脏、胰腺细胞的保护作用，可以促进胆汁分泌、调节胃机能、增加内脏血流量，以及降压、解热、抗菌、抗炎、抗肿瘤等作用。其结构式如下：

目前，国内外用栀子果实制备栀子苷时多用传统方法分离纯化栀子苷，如硅胶柱层析、氧化铝柱层析和重结晶等方法。传统的分离方法在制备过程中需要使用大量的有毒有机试剂，容易造成环境污染。而王兰采用现代分离技术制备型RP-HPLC从栀子药材中提取、分离栀子苷单体的完整方法。制备的栀子苷经四谱(核磁共振、红外光谱、紫外光谱、质谱，图略)共同检测，并同文献数据对照，确定纯度最高可达到99.9％，符合标准物质的质量要求[王兰，张鉴.RP-HPLC制备色谱法分离栀子苷单体.中成药.2003，25(9)：764-765]。但其前处理时，需要最大限度除去其它成分，提高样品溶液中栀子苷的含量，从而增加了单元制备时间的制备量。使得制备样品方法复杂，得率低，不适合大规模生产。

大孔吸附树脂是近十年来发展起来的一类有机高分子聚合物吸附剂，属多孔性交联聚合物。它具有良好的网状结构和较高的比表面积，通过物理特性从水溶液中有选择地吸附有机物质，从而达到分离提纯的目的。另外它具有物理化学稳定性高、吸附选择性独特、不受无机物存在的影响、再生简便、解吸条件温和、使用周期长、节省费用等诸多优点，广泛用于中药中化合物的分离纯化。沈荣光[沈荣光，陈正行.栀子药材中栀子苷的分离纯化.食品工业科技，2006，4(27)：123-127]用大孔吸附树脂X-5柱色谱初步分离、富集栀子提取液中的栀子苷，再经过冷冻干燥得到纯度为65.8％、得率91％的栀子苷。姚干通过研究[姚干，何宗玉，方积年.大孔吸附树脂纯化栀子中总环烯醚萜苷和栀子苷的研究.中草药，2006，37(1)：57-61]认为HPD450大孔吸附树脂能有效富集并纯化栀子总环烯醚萜苷、栀子苷。吕茂平[吕茂平，乔庆彬，庞春燕，等.大孔树脂对栀子苷分离效果的研究.中草药，2002，33：794-796]等通过比较D301R、D396、D296和AB-8四种型号大孔树脂对栀子苷的吸附效果，发现D301R树脂可用来分离栀子苷，但并未对栀子苷的制备工艺和栀子苷的纯度做进一步报道研究。任治军、何开泽等人比较了H103、NKA-II、HPD100A、HPD400A及D141等5种大孔吸附树脂对栀子提取液中栀子黄色素和栀子苷的吸附性能。确定了用H103和HPD100A两种非极性大孔树脂进行栀子苷的分离纯化，并确定了工艺参数，得到的栀子苷纯度达到81.3％，回收率为88.5％[任治军，何开泽，谭健，等.两种大孔吸附树脂结合分离纯化京尼平甙.离子交换与吸附，2006，22(2)：105-111]。由此可见，目前研究中均是采用大孔树脂吸附技术纯化制备栀子苷，但是单独采用大孔树脂吸附技术制备栀子苷，栀子苷的纯度均较低，需结合其他精制工艺作进一步研究。

发明内容

针对现有技术的上述不足，本发明所要解决的技术问题是提供一种制备工艺简单、低成本且对环境无污染的从栀子果实中制备高纯度栀子苷的方法。

本发明提供的高纯度栀子苷的制备方法，包括如下步骤：