[发明专利]一种病原微生物分析检测方法

权利要求书

1.一种病原微生物分析检测方法，其特征在于，包含步骤：

1)取用于病原微生物检测的微流控芯片进行检测，所述微流控芯片包括盖片和基片，盖片和基片封接贴合，盖片上设置有两条流体传输通道、六边形免疫识别/富集腔、生物发光检测单元和两个储液池，免疫识别/富集腔的两端分别与第一、第二流体传输通道连通，第一储液池与第一流体传输通道连接，第二储液池与第二流体传输通道连接，第一、二储液池分别位于芯片的两端，储液池与外部传输装置相连，生物发光检测单元位于第二流体传输通道的末端或第二储液池，第二流体传输通道与免疫识别/富集腔间为台阶状，其中所述第二流体传输通道深度小于免疫识别/富集腔深度；

2)将经抗体修饰的免疫微珠装填于步骤1)所述的微流控芯片中的免疫识别/富集腔中；

3)将待测样品溶液通过第一储液池和第一流体传输通道引入免疫识别/富集腔中，被免疫微珠识别、捕获和富集，所述待测样品中被分析的病原微生物浓度为10¹～10⁵cfu·μL^-1，待测样品的用量为1-10μL/次；

4)将裂解剂、生物发光试剂分别传输至免疫识别/富集腔中，与富集的病原微生物发生裂解反应和生物发光反应，生成发光复合物；

5)用缓冲溶液洗脱步骤4)产生的发光复合物，通过发光检测，定量分析待测样品中的病原微生物，所述发光检测按步骤1)所述的生物发光检测单元中完成。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)所述的微珠材质可是玻璃或聚苯乙烯。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述抗体的浓度为50～200μg·mL^-1。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤3)所述待测样品溶液的进样流速为1-5μL·min^-1，缓冲溶液的冲洗流速为10μL·min^-1，冲洗时间为5-20min。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤4)所述生物发光试剂用量≥5μL，发光试剂的传输流速为1μL·min^-1，发光检测时间为5-30min。