[发明专利]高脂食品中苯并(a)芘的快速检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种苯并(a)芘的检测方法，特别是涉及一种对高脂食品中苯并(a)芘的荧光快速检测方法。

背景技术

苯并(a)芘(benzo(a)pyrene)是已发现的200多种多环芳烃中最主要的环境和食品污染物，对人类和动物来说也是一种很强的致癌物质。苯并(a)芘(不但分布于空气、水、土壤等环境介质中，在食品中也广泛存在。苯并(a)芘危害人类的途径主要是对食品的污染，特别是加工高脂食品(如烟熏制食品、烘烤食品和煎炸食品等)中苯并(a)芘含量较高，长期食用含苯并(a)芘等多环芳烃的食物对人类健康将产生潜在威胁。可对机体各器官，如肺、肝、食道、胃肠等均可致癌。除此之外，苯并(a)芘(benzo(a)pyrene)还具有致畸性和遗传毒性。因此有必要对高脂肪食品中残留的苯并(a)芘进行严格的监控。但由于现存方法的繁琐性和复杂性，许多质检部门没能真正地开展此项工作。因此建立一种快速、简便、有效的高脂食品中苯并(a)芘含量的筛查技术十分必要。

我国国家标准(食品中苯并(a)芘的测定方法，中华人民共和国国家标准GB/T5009.27-1996.)对食品中苯并(a)芘的测定方法如下：

样品先用有机溶剂提取，或经皂化提取，再将提取液经液-液分配或色谱柱净化，然后在乙酰化滤纸上分离苯并(a)芘，因苯并(a)芘在紫外灯照射下呈紫色荧光斑点，将分离后有苯并(a)芘的滤纸部分剪下，用溶剂浸泡，用荧光分光光度计测荧光强度与标准比较定量。这种检测方法虽然是国家认可的定量方法，但实验过程极为复杂，样品损失也较多，给定量工作带来很多不便。

恒能量同步荧光法(简称CESFS)是同步荧光分析法的一个新分支。它是在激发和发射波长的同时扫描过程中，保持两者之间的一个恒定的能量差关系：(1/λex-1/λem)×10⁷＝Δυ＝常数。CESFS法以荧光体的量子振动跃迁的特征能量为依据而进行同步扫描。若选择一固定能量差Δυ等于某一振动能量差，则在同步扫描中，当激发能量和发射能量刚好匹配一特定吸收-发射跃迁条件时，该跃迁处于最佳条件，由此产生的同步光谱峰可达到最大强度。CESFS使常规荧光光谱和理论预测的荧光体能级跃迁联系起来，使所得到的同步光谱谱带宽度变窄。只要选择合适的Δυ就能产生极为简单的单峰到类似与常规荧光光谱的多峰。由于所选择的Δυ是一类化合物，而不仅仅是某个组分的特征，而且与光谱区域无关，因此便有可能只选择一个Δυ值于整个光谱的扫描。这样若要达到最大光谱分辨和免受杂散光干扰，整个CESFS光谱扫描过程可只用一个Δυ。

导数技术与恒能量同步荧光法联用能提高窄带的灵敏度，不仅使光谱简化、减小光谱重叠、减小散射光的影响；而且使谱带特征更明显，更有利于混合物中低浓度成分的鉴别。尤其是经导数放大后，对各组分分辨力更强，更有利于定性鉴别和定量分析。因此，导数-恒能量同步荧光光谱是一种用于复杂混合物分析的快速、简便和有效的办法。

目前报道的微波辅助萃取食品样品中苯并(a)芘方法，一般采用专业的微波消解系统，不仅仪器设备昂贵，操作繁琐，而且萃取结束后还需要较长的降温冷却时间，这无疑增加了总的萃取时间；样品的分析检测方法通常是高效液相色谱与荧光光谱的联用和气相色谱与火焰离子化或质谱的联用，因此要求样品进样分析前，需经过纯化步骤，这就相应的增加了样品总的分析时间，并且由于食品中的苯并(a)芘以痕量级存在，在经过纯化步骤后会造成较大的损失，影响检测结果的准确性。

本申请人在中国专利CN1632535A中披露了一种明显减少对食品样品前处理过程，操作简便快捷，费用低廉的食品中苯并(a)芘的荧光快速筛查方法，该方法对于脂肪含量较低的一般食品，仅需将样品剪碎研磨后浸泡在二氯甲烷中，收集上层清液，结合导数-恒能量同步荧光法即可测定其中的苯并(a)芘含量。

发明内容

本发明的目的在于提供一种操作简便快捷、费用低廉的高脂食品中苯并(a)芘的快速检测方法。

本发明包括以下步骤：

1)样品处理

取高脂食品样品放入磨口抽滤瓶中，加入氢氧化钾-甲醇溶液，再加入正己烷，盖上磨口塞后与装有水的容器一起放入微波炉内萃取后，取出冷却至室温，用水冲洗，静置分层后取出正己烷清液，旋转蒸发至干，用二氯甲烷定容，得处理后的待测样品溶液；

2)定性测量：使用带有导数—恒能量同步扫描的荧光分光光度计，对所述待测样品溶液进行恒能量同步荧光光谱的测绘，用于苯并(a)芘的鉴别和粗略测定；