[发明专利]一种食品中生物胺的检测方法

权利要求书

1.一种检测豆酱中生物胺的方法，包括：（1）标准曲线方程式的制备： 将生物胺标准样品衍生处理；将衍生处理后的生物胺标准样品采用高效液相 色谱法得到标准曲线方程式；（2）将待测的含有生物胺的豆酱样品衍生处理 后采用高效液相色谱法得到生物胺的吸收峰值，再按照标准曲线得到豆酱样 品中生物胺的含量；

所述的高效液相色谱法包括以下条件：进样量20μL；采用XDB-C₁₈柱为 高效液相色谱柱；流动相用pH 3.5的0.01mol/L KH₂PO₄溶液和甲醇进行梯 度洗脱，流速1.0mL/min，梯度洗脱；分别采用二级管阵列检测器和荧光检 测器进行测定：紫外检测波长为254nm、荧光检测激发波长330nm、发射波 长465nm；柱温30℃；

所述的生物胺标准样品衍生处理包括以下步骤：将浓度为0.5g/L的生物 胺各单标标准物溶于0.1mol/L盐酸溶液中，得到单标储备液；每个生物胺 的单标储备液中各取10mL定容至100mL；得生物胺混标储备液；将10mg的 丹磺酰氯溶于1mL的丙酮中，备用；将200μL 2mol/L的NaOH溶液加入 至1 mL标准溶液中，然后加300μL的饱和NaHCO₃溶液缓冲再加入1.5mL 的丹磺酰氯溶液，将混合后的溶液放入40℃恒温箱保温处理40min之后， 加入100μL的氨水去除丹磺酰氯终止反应，最后用乙腈定容至5mL；用有 机滤膜过滤，即得。

2.一种检测豆酱中生物胺的方法，包括：（1）标准曲线方程式的制备： 将生物胺标准样品衍生处理；将衍生处理后的生物胺标准样品采用超高效液 相色谱法得到标准曲线方程式；（2）将待测的含有生物胺的豆酱样品衍生处 理后采用超高效液相色谱法得到生物胺的吸收峰值，再按照标准曲线得到豆 酱样品中生物胺的含量；

其中所述的超高效液相色谱法包括以下条件：进样量5μL；采用 BEH-C₁₈柱为超高效液相色谱柱；流动相用pH 3.5的0.005mol/L乙酸铵溶 液和甲醇进行等度洗脱，乙酸铵和甲醇的体积比为70：30；分别采用紫外检 测器和荧光检测器测定：紫外检测波长254nm、荧光激发波长330nm、发射 波长465nm；流速0.250mL/min；柱温30℃；

所述的生物胺标准样品衍生处理包括以下步骤：将浓度为0.5g/L的生物 胺各单标标准物溶于0.1mol/L盐酸溶液中，得到单标储备液；每个生物胺 的单标储备液中各取10mL定容至100mL；得生物胺混标储备液；将10mg的 丹磺酰氯溶于1 mL的丙酮中，备用；将200μL 2mol/L的NaOH溶液加入 至1 mL标准溶液中，然后加300μL的饱和NaHCO₃溶液缓冲再加入1.5mL 的丹磺酰氯溶液，将混合后的溶液放入40℃恒温箱保温处理40min之后， 加入100μL的氨水去除丹磺酰氯终止反应，最后用乙腈定容至5mL；用有 机滤膜过滤，即得。