[发明专利]一种节杆菌突变株、利用该突变株生产乳糖酶的方法及用乳糖酶制备乳果糖的方法无效

专利信息
申请号: 201010114742.9 申请日: 2010-02-26
公开(公告)号: CN102168028A 公开(公告)日: 2011-08-31
发明(设计)人: 唐蕾;毛忠贵;张建华;杨瑞金;孙慧慧;刘莉 申请(专利权)人: 江南大学
主分类号: C12N1/20 分类号: C12N1/20;C12N9/38;C12P19/14;C12R1/06
代理公司: 北京中恒高博知识产权代理有限公司 11249 代理人: 夏晏平
地址: 214122 江*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 杆菌 突变 利用 生产 乳糖酶 方法 制备 果糖
【权利要求书】:

1.一种节杆菌突变株,其特征在于,该菌株分类命名为Arthrobactersp.jnsb-2,由中国典型培养物保藏中心保藏,保藏号为CCTCC M 209210。

2.一种如权利要求1所述的节杆菌突变株的应用,其特征在于,所述的节杆菌突变株应用于发酵生产乳糖酶。

3.一种利用如权利要求1所述的节菌突变株生产乳糖酶的方法,将菌株经固体斜面活化、种子培养后再进行发酵培养,其特征在于:

发酵培养的培养基:碳源可选用葡萄糖、乳糖、淀粉、麦芽糖或甘油中的任一种,其质量体积比浓度为0.2%-2%;氮源可选用酵母膏、牛肉膏、蛋白胨、豆粕或玉米浆中的一种或多种,其质量体积比浓度为0.5-2.5%;无机盐可选用硫酸镁、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾或氯化铁中的一种或多种,其浓度为0.05-23mmol/L;

发酵培养的条件为:20-37℃培养12-30h;

将生成的发酵液经5000-8000rpm离心得到菌体,随后经破碎细胞、10000-12000rpm离心取上清液即为酶液。

4.根据权利要求3所述的利用节杆菌突变株生产乳糖酶的方法,其特征在于,所述发酵培养基的碳源、氮源、无机盐分别优选乳糖、玉米浆、氯化铁。

5.一种用乳糖酶制备乳果糖的方法,其特征在于,用乳糖酶作为催化剂,以乳糖和果糖为底物制备乳果糖;

(1)底物溶液的配制

用pH5.5-8.0的磷酸缓冲液配制乳糖和果糖溶液,其中乳糖的质量体积比浓度为2-40%,果糖的质量体积比浓度为1%-20%;

(2)水解和转苷反应

向步骤(1)的溶液中加入250-400U/L乳糖酶,在20-40℃反应4-8h,进行水解和转苷反应,得到酶解液;

(3)酶解液的后处理

向步骤(2)中得到的酶解液中加入无水乙醇,使其终浓度为40-70%,经离心后取上清液经60-65℃加热浓缩后处理即可制得乳果糖浆。

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