[发明专利]一种节杆菌突变株、利用该突变株生产乳糖酶的方法及用乳糖酶制备乳果糖的方法无效
申请号: | 201010114742.9 | 申请日: | 2010-02-26 |
公开(公告)号: | CN102168028A | 公开(公告)日: | 2011-08-31 |
发明(设计)人: | 唐蕾;毛忠贵;张建华;杨瑞金;孙慧慧;刘莉 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N9/38;C12P19/14;C12R1/06 |
代理公司: | 北京中恒高博知识产权代理有限公司 11249 | 代理人: | 夏晏平 |
地址: | 214122 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 杆菌 突变 利用 生产 乳糖酶 方法 制备 果糖 | ||
1.一种节杆菌突变株,其特征在于,该菌株分类命名为Arthrobactersp.jnsb-2,由中国典型培养物保藏中心保藏,保藏号为CCTCC M 209210。
2.一种如权利要求1所述的节杆菌突变株的应用,其特征在于,所述的节杆菌突变株应用于发酵生产乳糖酶。
3.一种利用如权利要求1所述的节菌突变株生产乳糖酶的方法,将菌株经固体斜面活化、种子培养后再进行发酵培养,其特征在于:
发酵培养的培养基:碳源可选用葡萄糖、乳糖、淀粉、麦芽糖或甘油中的任一种,其质量体积比浓度为0.2%-2%;氮源可选用酵母膏、牛肉膏、蛋白胨、豆粕或玉米浆中的一种或多种,其质量体积比浓度为0.5-2.5%;无机盐可选用硫酸镁、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾或氯化铁中的一种或多种,其浓度为0.05-23mmol/L;
发酵培养的条件为:20-37℃培养12-30h;
将生成的发酵液经5000-8000rpm离心得到菌体,随后经破碎细胞、10000-12000rpm离心取上清液即为酶液。
4.根据权利要求3所述的利用节杆菌突变株生产乳糖酶的方法,其特征在于,所述发酵培养基的碳源、氮源、无机盐分别优选乳糖、玉米浆、氯化铁。
5.一种用乳糖酶制备乳果糖的方法,其特征在于,用乳糖酶作为催化剂,以乳糖和果糖为底物制备乳果糖;
(1)底物溶液的配制
用pH5.5-8.0的磷酸缓冲液配制乳糖和果糖溶液,其中乳糖的质量体积比浓度为2-40%,果糖的质量体积比浓度为1%-20%;
(2)水解和转苷反应
向步骤(1)的溶液中加入250-400U/L乳糖酶,在20-40℃反应4-8h,进行水解和转苷反应,得到酶解液;
(3)酶解液的后处理
向步骤(2)中得到的酶解液中加入无水乙醇,使其终浓度为40-70%,经离心后取上清液经60-65℃加热浓缩后处理即可制得乳果糖浆。
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