[发明专利]用猪肾细胞系(IBRS-2)生产猪瘟活疫苗的方法及其制品

权利要求书

1.用猪肾细胞系(IBRS-2)生产猪瘟活疫苗的方法，其特征在于：包括如下技术步骤：

(1)选择猪肾细胞系(IBRS-2)作为制苗用细胞：

(2)制苗用细胞的传代与培养：猪肾细胞系(IBRS-2)经EDTA-胰酶细胞分散液消化传代，以细胞生长液继续培养，形成良好单层时，用于继续传代或接种病毒；

(3)细胞毒种的繁殖：用细胞维持液，将新鲜脾毒制成病毒悬液，接种由步骤(2)制得良好单层的猪肾细胞系(IBRS-2)，继续培养；每隔4～5日收获换液一次，取二收、三收细胞培养毒液作为生产用毒种；

(4)制苗毒液的繁殖：取步骤(2)中已形成良好单层的猪肾细胞系(IBRS-2)培养瓶，弃去所述细胞生长液，接种含猪瘟兔化弱毒的细胞维持液，继续培养；接毒后第5日作第一次收获换液，以后每隔4日收获换液1次，收获的毒液置-15℃以下保存；

(5)配苗、分装及冻干：将检验合格的步骤(4)中所述毒液，混合于同一容器内，加入稳定剂，同时加入抗生素，充分摇匀，定量分装；每头份含细胞毒液不少于0.015ml，分装后迅速进行冷冻真空干燥后即得成品。

2.根据权利要求1所述的用猪肾细胞系(IBRS-2)生产猪瘟活疫苗的方法，其特征在于：步骤(2)、(3)、(4)中所述的细胞培养温度是36～37℃。

3.根据权利要求1所述的用猪肾细胞系(IBRS-2)生产猪瘟活疫苗的方法，其特征在于：步骤(3)及(4)中所述的接种量为含3％～5％生产用细胞毒种或0.2％～0.5％脾毒种的维持液。

4.根据权利要求1所述的用猪肾细胞系(IBRS-2)生产猪瘟活疫苗的方法，其特征在于：步骤(2)中所述细胞生长液的配方是：90％～92％MEM液、8％～10％犊牛血清、加适量的抗菌素，pH值调整为7.0～7.2。

5.根据权利要求1所述的用猪肾细胞系(IBRS-2)生产猪瘟活疫苗的方法，其特征在于：步骤(3)及(4)中所述细胞维持液的配方是：95％～98％MEM液、2％～5％犊牛血清、加适量的抗菌素，pH值调整为7.2～7.4。