[发明专利]一种复合微生态饲料添加剂的制备方法

权利要求书

1.一种复合微生态饲料添加剂的制备方法，其特征是包括以下步骤：

(1)富含微量元素的有机功能酵母的制备

A、硒酵母制备：将啤酒酵母于YEPD斜面上传代，获得活化后菌种，将活化后菌种接种于制备好的YEPD液体培养基，培养20～25h作为种子液；制备pH4.5的YEPD液体培养基，将活化后的啤酒酵母以3～6％的菌重量接种，培养18～25h后，加入3～6mg/L的亚硒酸钠溶液，继续培养至45～55h；将得到的发酵液离心，收集菌体并烘干，即得到硒酵母；

B、铁酵母制备：将啤酒酵母于YEPD斜面上传代，获得活化后菌种，将活化后菌种接种于制备好的YEPD液体培养基，培养20～25h作为种子液；制备pH6.0的YEPD液体培养基，将活化后的啤酒酵母以8～12％的菌重量接种，培养18～25h后，加入700～900mg/L的硫酸亚铁溶液，继续培养至55～65h；将得到的发酵液离心，收集菌体并烘干，即得到铁酵母；

C、锌酵母制备：将啤酒酵母于YEPD斜面上传代，获得活化后菌种，将活化后菌种接种于制备好的YEPD液体培养基，培养20～25h作为种子液；制备pH6.0的YEPD液体培养基，将活化后的啤酒酵母以8～12％的菌重量接种，培养18～25h，加入700～900mg/L的硫酸锌溶液，继续培养至55～65h；将得到的发酵液离心，收集菌体并烘干，即得到锌酵母；

(2)多菌复合酶的制备

A、原料混合拌料

用预处理过的原料醋糟、麦麸、玉米粉按重量比(1.5～2.5)∶(0.8～1.5)∶(0.8～1.5)配料，在混合原料中分别加入占原料总重量的3～6％复合大曲和0.5～1.2％硫酸铵，搅拌均匀即可接种；

所述复合大曲的制备方法如下：

a大曲原料的处理：将大曲原料混合、筛选、粉碎，然后加水，使得大曲原料与水的重量比为1∶2.5～3；

b种曲的制备：将试管斜面培养基中的以下菌种：黑曲霉(Aspergillus niger)41254、黑曲霉(Aspergillus niger)UV-11、红曲霉属(Monascus sp.)、总状毛霉(Mucor racemosus)、 雅致放射毛霉(Actinomucor elegans)、米根霉(Rhizopus oryzae)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、克鲁斯假丝酵母(Candida krusei)、醋杆菌属(Acetobacter sp.)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、德氏乳杆菌(Lactobacillus delbrueckiisubsp.bulgaricus)6100各取一环，分别接入装有大曲原料的三角瓶中进行培养，控制发酵温度为30℃～33℃，时间为44～46h，pH值为5～7，然后再继续进行扩大培养，得到种曲；

c复合大曲的制备：采用生料制曲，将得到的种曲与大曲原料按1∶45～55的重量比接入固态发酵设备，充分混合均匀后，控制发酵温度保持在30℃～33℃，pH值为5～7，鼓风量为50～75m³/min，当发酵时间达到30～33h时，出曲，然后将得到的大曲放入真空干燥箱，进行低温真空烘干，即得到复合大曲；

B、接种

使用培养40～50h的酵母菌，培养20～30h的黑曲霉和米曲霉，培养5～10h的芽孢杆菌和培养8～15h的乳酸菌这5株菌的培养液作为种子液，按酵母菌接种量为2～4％，黑曲霉接种量为2～4％，芽孢杆菌接种量为3～5％，乳酸菌的接种量为3～5％，米曲霉接种量3～6％时接种，再加上拌料时加入的复合大曲，调整培养料的含水量为50～65％；

C、固态发酵培养

接种后采用固态发酵培养，培养温度为30～35℃，培养至80～95h后，出料，即得到多菌复合酶；

(3)将步骤(1)中得到的富含微量元素的有机功能酵母，硒酵母、铁酵母、锌酵母和步骤(2)中得到的多菌复合酶以及植酸酶按下列重量比混合均匀：硒酵母0.5～1.5％，铁酵母1～3％，锌酵母1～3％，多菌复合酶80.5～89.5％，植酸酶8～12％；然后低温真空干燥、粉碎，即得到复合微生态饲料添加剂。