[发明专利]测定银杏叶或其相关制剂中山柰酚葡萄糖鼠李糖苷含量的方法

说明书

技术领域

本发明属于药品质量控制领域，涉及一种测定银杏叶或其相关制剂中山柰酚葡萄 糖鼠李糖苷含量的方法。

背景技术

银杏叶又名白果叶，来源于银杏科植物银杏(Ginkgo biloba L.)的干燥叶，在我 国有悠久的药用历史，主要用于治疗肺虚咳喘和心悸怔忡等症。

现代药理学研究表明，银杏叶具有清除氧自由基、降血脂、增强中枢神经系统功 能、调节神经递质和激素水平、改善血液流变状态、抗炎、抗过敏等作用。因而用银 杏叶研制开发的制剂品种越来越多，临床应用越来越广泛。目前在临床上应用的有斯 泰隆、金纳多、天保宁、银可络、舒血宁、络欣通，冠心酮等多种品牌的片剂、颗粒 剂、注射剂，主要用于治疗各种心脑血管疾病、糖尿病、神经系统疾病和呼吸系统疾 病等。

银杏叶及其制剂中主要有效成分为黄酮类和内酯类两类成分，到目前为止，国内 外关于银杏叶及其制剂的质量控制方法普遍是测定这两类成分的含量。关于银杏叶及 其制剂中黄酮类含量测定的方法，虽然已经有高效液相色谱法和薄层扫描法，但其测 定原理都是在水解的基础上，以槲皮素、山柰素和异鼠李素三种黄酮苷元为对照，经 过折算而进行测定的，这两种方法的主要缺点是：(1)需要水解。在水解过程中，由 于操作等多方面的原因，可能发生水解不够或水解过度等现象，导致测定结果不准确； 而且水解过程费时费力，严重影响工作效率。(2)测定的是黄酮苷元的含量。由于测 定的是水解后的黄酮苷元的含量，不能准确反映银杏叶及其制剂中黄酮苷类成分的真 实含量，不能达到真正控制银杏叶及其制剂质量均一性的目的。

发明内容

本发明的目的是提供一种测定银杏叶或其相关制剂中山柰酚葡萄糖鼠李糖苷含 量的方法。

本发明提供的测定银杏叶或其相关制剂中山柰酚葡萄糖鼠李糖苷含量的方法，包 括如下步骤：

在无阴性干扰的情况下，以山柰酚葡萄糖鼠李糖苷为对照品，利用高效液相色谱 对作为供试品的所述银杏叶或其相关制剂中的山柰酚葡萄糖鼠李糖苷进行测定，由外 标法计算得到所述银杏叶或其相关制剂中山柰酚葡萄糖鼠李糖苷的含量。

该方法中，在所述测定步骤之前，先将所述对照品和所述供试品溶于溶剂中；溶 解所述对照品的溶剂选自甲醇、甲醇的水溶液、乙醇、乙醇的水溶液和流动相中的任 意一种；溶解所述供试品的溶剂选自甲醇、甲醇的水溶液、乙醇、乙醇的水溶液和流 动相中的任意一种。

所述测定步骤中，检测波长为190nm～400nm，优选360nm。流动相为下述溶剂 a～溶剂c中的任意一种：所述溶剂a为甲醇的水溶液，所述溶剂b为乙腈的水溶液， 所述溶剂c为甲醇、乙腈和水组成的混合液。所述流动相还可为溶剂a-溶剂c中的任 意一种与修饰剂、缓冲溶液、离子抑制剂和pH值调节剂中的至少一种组成的混合液； 其中，所述溶剂a为甲醇的水溶液，所述溶剂b为乙腈的水溶液，所述溶剂c为甲醇、 乙腈和水组成的混合液；所述修饰剂选自四氢呋喃、异丙醇和二氧六环中的任意一种； 所述缓冲溶液选自磷酸盐缓冲溶液、乙酸盐缓冲溶液和柠檬酸盐缓冲溶液中的任意一 种；所述离子抑制剂选自十二烷基磺酸钠、十一烷基磺酸钠、己烷磺酸钠、庚烷磺酸 钠、辛烷磺酸钠和壬烷磺酸钠中的任意一种；所述pH值调节剂选自甲酸、乙酸、磷 酸和柠檬酸中的任意一种。所述修饰剂的加入量为所述溶剂a或溶剂b或溶剂c体积 的0.5％～10.0％，优选3.0％～5.0％；所述缓冲溶液的加入量为所述溶剂a或溶剂b或 溶剂c体积的0.5％～10.0％，优选3.0％～5.0％；所述离子抑制剂的加入量为所述溶剂 a或溶剂b或溶剂c体积的0.1％～3.0％，优选0.5％～1.0％；所述pH值调节剂的加入 量为所述溶剂a或溶剂b或溶剂c体积的0.05％～5.0％，优选0.2％～1.0％。所述相关 制剂为银杏叶药材、银杏叶提取物、含有银杏叶的固体制剂或含有银杏叶的液体制剂， 其中，所述固体制剂为丸剂、颗粒剂、片剂、胶囊剂、滴丸剂、散剂或茶剂，所述液 体制剂为注射剂、口服液、酊剂或煎膏剂。

本发明提供的测定银杏叶或其相关制剂中山奈酚葡萄糖鼠李糖苷含量的方法，可 为下述方法a-方法c中的任一方法：

所述方法a为：

1)制备对照品的溶液：称取山柰酚葡萄糖鼠李糖苷对照品，加甲醇制成每1ml 含0.04mg的溶液，得到所述对照品的溶液；

2)制备供试品溶液：