[发明专利]一种从双孢蘑菇中分离双孢蘑菇多糖的方法及其测定方法

权利要求书

1.一种从双孢蘑菇中分离双孢蘑菇多糖的方法，其特征在于：

使用材料：鲜双孢蘑菇；

使用试剂：苯酚、浓硫酸、葡萄糖、硫酸铵(NH₄)₂SO₄、聚乙二醇 (PEG)6000、蒸馏水；

使用仪器设备：10mL离心管、50mL离心管、真空冷冻干燥器、离 心机；

分离方法及步骤

(1)材料预处理：将新鲜的双孢蘑菇真空冷冻干燥24h；

(2)热水浸提粗多糖：将干燥后的双孢菇粉碎后称取两克，置 于不锈钢或玻璃容设备中，加入200mL蒸馏水，大火煮沸，文火维持 1小时，离心取上清液，沉淀放回加热设备中加水100mL继续加热致 沸腾，文火维持30min，再离心取上清液；重复三次，将获得的上清 液装入1000mL容量瓶中用蒸馏水定容至1000mL备用；

(3)双水相萃取操作：精确称取聚乙二醇(PEG)6000 2.66g， 硫酸铵4.28g，加入到50mL离心管中，加入样品稀释液20mL混匀； 同时称取PEG6000 2.66g，硫酸铵4.28g，加入到50mL离心管中，加 入蒸馏水20mL混匀，作为对照，在离心机中以3000r/min离心5min， 读取样品管上下相体积，上相体积为9.5mL，下相体积为14.5mL；

得到的双孢蘑菇多糖大部分被分配在PEG相(上相)中。

2.根据权利要求1所述的一种从双孢蘑菇中分离双孢蘑菇多糖的方 法，其特征在于：

最佳的条件为：PEG6000的质量百分数为13.3％，(NH₄)₂SO₄的质 量百分数为21.4％，pH值为7，温度为25℃，在一个大气压条件下操 作。