[发明专利]一种快速培育纯合抗虫兼抗除草剂转基因观赏羽衣甘蓝的方法

权利要求书

1.一种培育转基因甘蓝的方法，包括如下步骤：用含有目的基因的重组农杆菌侵染甘蓝的子叶，再进行共培养，得到转基因甘蓝。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述甘蓝的子叶为带柄子叶；所述柄的长度为1mm-4mm；所述柄的长度具体为1mm、2mm或4mm。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述侵染包括如下步骤：将所述甘蓝的子叶置于所述含有目的基因的重组农杆菌的菌液中，浸泡3min-5min，得到侵染后的子叶。

4.根据权利要求1、2或3所述的方法，其特征在于：所述含有目的基因的重组农杆菌的菌液的OD600值为0.3-0.5。

5.根据权利要求1-4中任一所述的方法，其特征在于：所述共培养的方法包括如下步骤：将所述侵染后的子叶置于共培养培养基中，在温度为22℃-27℃且黑暗的条件下培养2天；

所述共培养培养基由NH₄NO₃、KNO₃、CaCl₂·2H₂O、MgSO₄·7H₂O、KH₂PO₄、FeSO₄·7H₂O、EDTA·Na₂、KI、CoCl₂·6H₂O、H₃BO₃、Na₂MoO₄·2H₂O、MnSO₄·4H₂O、CuSO₄·5H₂O、ZnSO₄·7H₂O、肌醇、烟酸、甘氨酸、硫胺素、盐酸吡哆辛、6-苄氨基腺嘌呤、α-萘乙酸、蔗糖、琼脂、乙酰丁香酮和水组成；

所述NH₄NO₃在所述共培养培养基中的浓度为1650mg/L，所述KNO₃在所述共培养培养基中的浓度为1900mg/L，所述CaCl₂·2H₂O在所述共培养培养基中的浓度为440mg/L，所述MgSO₄·7H₂O在所述共培养培养基中的浓度为370mg/L，所述KH₂PO₄在所述共培养培养基中的浓度为170mg/L，所述FeSO₄·7H₂O在所述共培养培养基中的浓度为27.8mg/L，所述EDTA·Na₂在所述共培养培养基中的浓度为37.3mg/L，所述KI在所述共培养培养基中的浓度为0.83mg/L，所述CoCl₂·6H₂O在所述共培养培养基中的浓度为0.025mg/L，所述H₃BO₃在所述共培养培养基中的浓度为6.2mg/L，所述Na₂MoO₄·2H₂O在所述共培养培养基中的浓度为0.25mg/L，所述MnSO₄·4H₂O在所述共培养培养基中的浓度为22.3mg/L，所述CuSO₄·5H₂O在所述共培养培养基中的浓度为0.025mg/L，所述ZnSO₄·7H₂O在所述共培养培养基中的浓度为8.6mg/L，所述肌醇在所述共培养培养基中的浓度为100mg/L，所述烟酸在所述共培养培养基中的浓度为5mg/L，所述甘氨酸在所述共培养培养基中的浓度为2.0mg/L，所述硫胺素在所述共培养培养基中的浓度为0.1mg/L，所述盐酸吡哆辛在所述共培养培养基中的浓度为0.5mg/L，所述6-苄氨基腺嘌呤在所述共培养培养基中的浓度为1.0mg/L，所述α-萘乙酸在所述共培养培养基中的浓度为0.1mg/L，所述蔗糖在所述共培养培养基中的浓度为30g/L，所述琼脂在所述共培养培养基中的浓度为1.0g/L，所述乙酰丁香酮在所述共培养培养基中的浓度为100μmol/L，所述共培养培养基的pH值为5.2。