[发明专利]一种天然海藻内生真菌二萜生物碱类化合物及其制备和应用

权利要求书

1.一种天然海藻内生真菌二萜生物碱类化合物，其特征在于所述海藻内生真菌二萜生物碱类化合物如(I)所示。

2.一种按权利要求1所述的天然海藻内生真菌二萜生物碱类化合物的制备方法，其特征在于如下步骤制备：

1)将米曲霉(Aspergillus oryzae)cf-2接种于真菌液体培养基中静止发酵20-25天，过滤，发酵液经乙酸乙酯萃取浓缩，收集的菌丝体用有机溶剂提取，而后再经乙酸乙酯萃取浓缩，发酵液所得浓缩物和菌丝体所得浓缩物合并，即为粗提物；

所述米曲霉(Asp.oryzae)cf-2，其于2010年3月1日保存于中国典型培养物保藏中心CCTCC，保藏编号为CCTCC M 2010045，株号为cf-2；

2)取步骤1)中的粗提物进行硅胶柱层析，用有机溶剂进行梯度洗脱，收集洗脱液，洗脱液经薄层层析检测；

3)收集步骤2)中以洗脱液体积比0-10∶100梯度的洗脱组分，将收集的洗脱组分进行凝胶柱层析、硅胶柱层析和薄层层析分离纯化，纯化收集Rf值为0.5-0.6组分，即得海藻内生真菌二萜生物碱类化合物。

3.按权利要求2所述的天然海藻内生真菌二萜生物碱类化合物的制备方法，其特征在于：步骤1)中的有机溶剂提取液为氯仿、丙酮、乙酸乙酯、乙醇或甲醇中一种或几种。

4.按权利要求2所述的天然海藻内生真菌二萜生物碱类化合物的制备方法，其特征在于：步骤2)中的有机溶剂为石油醚-乙酸乙酯或石油醚-丙酮。

5.按权利要求2所述的天然海藻内生真菌二萜生物碱类化合物的制备方法，其特征在于：步骤3)所述凝胶柱层析洗脱液为体积比1-2∶1的氯仿-甲醇或氯仿-乙醇；硅胶柱层析洗脱液为乙酸乙酯或丙酮；薄层层析展开剂为乙酸乙酯。

6.按权利要求2所述的天然海藻内生真菌二萜生物碱类化合物的制备方法，其特征在于：步骤3)所述凝胶柱层析时收集经TLC检测含红色斑点的组分。

7.一种按权利要求1所述的天然海藻内生真菌二萜生物碱类化合物的应用，其特征在于：所述海藻内生真菌二萜生物碱类化合物具有抑菌作用。

8.按权利要求7所述的天然海藻内生真菌二萜生物碱类化合物的应用，其特征在于：所述海藻内生真菌二萜生物碱类化合物具有抑制革兰氏阴性细菌活性的作用。

9.按权利要求7所述的天然海藻内生真菌二萜生物碱类化合物的应用，其特征在于：所述海藻内生真菌二萜生物碱类化合物具有抑制大肠杆菌活性的作用。