[发明专利]一种固相环化合成Laterocidin化合物的方法

权利要求书

1.一种固相环化合成Laterocidin化合物的方法，其特征在于步骤如下：

步骤1：将氨基树脂加入反应器中，再加入脱除芴甲氧羰基试剂反应洗涤树脂，称取相当于树脂摩尔比2～5倍上载量的氨基酸加入反应器中，加入活化剂1-羟基苯并三唑和缩水剂二异丙基碳二亚胺，其中氨基酸、活化剂、缩水剂三者的摩尔比例为1∶1∶1；

所述脱除芴甲氧羰基试剂的制备为：吡啶的10～30％的N，N二甲基甲酰胺溶液，摩尔比例过量1～3倍，反应15～30分钟；

步骤2：按照步骤1依次连接上其它氨基酸，获得保护的直链多肽结构式

其中Aa6为任意氨基酸，X＝NH；

步骤3：在树脂中加脱除芴甲氧羰基试剂反应，用N，N-二甲基甲酰胺洗涤树脂；加入2％的肼反应2分钟，重复三次；然后分别用N，N-二甲基甲酰胺、二氯甲烷、乙醇、二氯甲烷依次洗涤3次树脂，得到环合前体化合物，结构式为

其中Aa5、Aa6为任意氨基酸，X＝NH；

步骤4：在树脂上环合时，添加环合剂六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷，1-羟基苯并三唑和N，N-二异丙基乙胺；树脂∶六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷∶1-羟基苯并三唑∶N，N-二异丙基乙胺的摩尔比例为1∶5∶5∶0.1，并加入浸没物质的有机溶剂，室温反应12小时以上；然后分别用N，N-二甲基甲酰胺、二氯甲烷、乙醇、二氯甲烷依次洗涤3次树脂得到环合化合物；所述有机溶剂为N，N-二甲基甲酰胺、二氯甲烷、三氯甲烷、四氢呋喃中的一种或几种的混合溶剂；所述环合化合物结构式为

其中Aa5、Aa6为任意氨基酸，X＝NH；

步骤5：加入剪切试剂将脂肪酰环酯肽从树脂上剪下，剪切反应时间为2～5小时；滤除树脂珠，用氮气或空气流赶走滤液中的三氟乙酸，然后经冷乙醚沉淀和洗涤干燥得到Laterocidin化合物，结构式为

其中Aa5、Aa6为任意氨基酸，X＝NH；

所述剪切试剂为三氟乙酸、三异丙基硅烷、苯酚和水，重量比例为95∶1∶2∶2。

2.根据权利要求1所述的固相环化合成Laterocidin化合物的方法，其特征在于：采用“王树脂”替代步骤1中的氨基树脂，且不用脱除芴甲氧羰基试剂反应洗涤树脂；步骤2获得保护的直链多肽结构式中X＝O；步骤3得到的环合前体化合物结构式中X＝O；步骤4环合化合物结构式中X＝O；步骤5得到Laterocidin化合物结构式中X＝O。

3.根据权利要求1所述的固相环化合成Laterocidin化合物的方法，其特征在于：所述脱除芴甲氧羰基试剂的反应为两次，第一次时间为5～15分钟，第二次时间为5～15分钟。

4.根据权利要求1所述的固相环化合成Laterocidin化合物的方法，其特征在于：所述步骤1中的氨基酸为Fmoc-Asp-ODmab或者Fmoc-Glu-ODmab。

5.根据权利要求1所述的固相环化合成Laterocidin化合物的方法，其特征在于：所述步骤2中的氨基酸为N-芴甲氧羰基-氨基酸，相对于树脂上载量的2～5倍。

6.根据权利要求1所述的固相环化合成Laterocidin化合物的方法，其特征在于：所述每连接一个氨基酸都要进过kaiser test，如反应呈现阳性则重复连接氨基酸。

7.根据权利要求1所述的固相环化合成Laterocidin化合物的方法，其特征在于：所述脱除芴甲氧羰基保护后都要进过kaiser test，如反应呈现阴性则重复脱除芴甲氧羰基保护。

8.根据权利要求1所述的固相环化合成Laterocidin化合物的方法，其特征在于：所述步骤5处理干燥是指将剪切液用氮气或者空气吹干，加入冰乙醚沉淀析出固体，离心干燥得到Laterocidin粗品并回收乙醚。