[发明专利]一种固相环化合成Laterocidin化合物的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种固相环化合成Laterocidin化合物的方法，特别是涉及到合成起点的选择、基团的保护策略和肽链的首尾环合方法。

背景技术

自20世纪40年代人类历史上发现第一个环肽Gramicidin S(GS)以来，人们不断的从植物、真菌、细菌以及海洋生物中分离得到各种具有生物活性的环肽。生物活性环肽能形成限制性构象，与相应线性肽相比在生物体内具有更好的抗酶解和抗化学解得能力，在形成荷尔蒙、抗生素、离子载体系统、抗真菌素、癌制剂以及毒素等方面都具有良好的生物活性。生物环肽在寻找酶的抑制剂、受体拮抗剂等许多方面也有着广阔的应用前景，随着环肽组合库研究的不断发展，在寻找受体和药物作用靶点工作中，环肽组合库将可能成为很好的诊断和治疗研究工具。无论从何种意义上来说，环肽都是最重要的一类多肽化合物。特别是一些特定结构的环肽，在药物、纳米材料、生物离子通道及超分子自组装等领域都具有广泛的用途。而且随着各种对常用抗生素具有抵抗作用的致病性细菌和真菌的出现，人类的健康受到很大的威胁，因此寻找新的抗菌剂成为目前一项重大的任务。近年来，制药业很少推出非常有效的新抗生素，而且就目前的抗生素其活性也没有任何提高。环肽潜在的抗菌活性使其在自然免疫方面起着很大的作用。关于用环肽治疗传染病方面的研究一直在进行。鉴于环肽的诸多优点和其在天然产物中的含量很低，近年来对多肽研究的热点已转移到环肽的合成上。但环肽复杂的结构使得其合成需要熟练的技巧，即使是中等尺度的环肽，要使产率达到50％以上也是一件很难的事情。

Laterocidin是具有抗菌活性的一种新型环肽化合物。俄罗斯专利(RU2229520Cl20040527)中报道了从侧孢芽孢杆菌中提取分离Laterocidin化合物的方法、化学结构和抗菌活性。但是，天然产物含量低，提取收率低，提取成本高。

发明内容

要解决的技术问题

为了避免现有技术的不足之处，本发明提出一种固相环化合成Laterocidin化合物的方法，通过合成起点及环合方法的选择，首次化学合成Laterocidin化合物及其类似物。主要解决Laterocidin化合物及其类似物化学环合困难及从天然产物中提取成本高的问题。

技术方案

一种固相环化合成Laterocidin化合物的方法，其特征在于步骤如下：

步骤1：将氨基树脂加入反应器中，再加入脱除芴甲氧羰基试剂反应洗涤树脂，称取相当于树脂摩尔比2～5倍上载量的氨基酸加入反应器中，加入活化剂1-羟基苯并三唑和缩水剂二异丙基碳二亚胺，其中氨基酸、活化剂、缩水剂三者的摩尔比例为1∶1∶1；

所述脱除芴甲氧羰基试剂的制备为：吡啶的10～30％的N，N二甲基甲酰胺溶液，摩尔比例过量1～3倍，反应15～30分钟；

步骤2：按照步骤1依次连接上其它氨基酸，获得保护的直链多肽结构式

其中Aa6为任意氨基酸，X＝NH；

步骤3：在树脂中加脱除芴甲氧羰基试剂反应，用N，N-二甲基甲酰胺洗涤树脂；加入2％的肼反应2分钟，重复三次；然后分别用N，N-二甲基甲酰胺、二氯甲烷、乙醇、二氯甲烷依次洗涤3次树脂，得到环合前体化合物，结构式为

其中Aa5、Aa6为任意氨基酸，X＝NH；

步骤4：在树脂上环合时，添加环合剂六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷，1-羟基苯并三唑和N，N-二异丙基乙胺；树脂∶六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷∶1-羟基苯并三唑∶N，N-二异丙基乙胺的摩尔比例为1∶5∶5∶0.1，并加入浸没物质的有机溶剂，室温反应12小时以上；然后分别用N，N-二甲基甲酰胺、二氯甲烷、乙醇、二氯甲烷依次洗涤3次树脂得到环合化合物；所述有机溶剂为N，N-二甲基甲酰胺、二氯甲烷、三氯甲烷、四氢呋喃中的一种或几种的混合溶剂；所述环合化合物结构式为

其中Aa5、Aa6为任意氨基酸，X＝NH；

步骤5：加入剪切试剂将脂肪酰环酯肽从树脂上剪下，剪切反应时间为2～5小时；滤除树脂珠，用氮气或空气流赶走滤液中的三氟乙酸，然后经冷乙醚沉淀和洗涤干燥得到Laterocidin化合物，结构式为

其中Aa5、Aa6为任意氨基酸，X＝NH；

所述剪切试剂为三氟乙酸、三异丙基硅烷、苯酚和水，重量比例为95∶1∶2∶2。