[发明专利]利用超声结合EDTA溶液去除狂犬病疫苗制品中残留DNA的方法有效
| 申请号： | 201010132556.8 | 申请日： | 2010-03-26 |
| 公开（公告）号： | CN101780276A | 公开（公告）日： | 2010-07-21 |
| 发明（设计）人： | 徐德启;张译;程晓耕;汪春义;苏文全;王凯 | 申请（专利权）人： | 辽宁依生生物制药有限公司 |
| 主分类号： | A61K39/205 | 分类号： | A61K39/205;A61P31/14 |
| 代理公司： | 沈阳科威专利代理有限责任公司 21101 | 代理人： | 王勇 |
| 地址： | 110179 *** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 利用 超声 结合 edta 溶液 去除 狂犬病 疫苗 制品 残留 dna 方法 | ||
1.一种利用超声结合EDTA溶液去除狂犬病疫苗制品中残留DNA的方法，其特征 是：以狂犬病疫苗浓缩液为原料，向狂犬病疫苗浓缩液中加入EDTA溶液，加入后使EDTA 的最终浓度为10mmol/L或1mmol/L，二者反应后，再使用超声波细胞粉碎机超声处理狂 犬病疫苗浓缩液，具体是使用Φ6变幅杆的Scientz-IID型超声波细胞粉碎机对狂犬病疫 苗浓缩液进行超声处理，在冰浴保护下进行超声，保证浓缩液温度不超过26℃，设置超 声功率为600W，工作时间2s，间隙时间3s，总工作时间20min，最后使用传统工艺的 分子筛层析纯化对超声处理后的狂犬病疫苗浓缩液进行纯化。
2.按照权利要求1所述的利用超声结合EDTA溶液去除狂犬病疫苗制品中残留DNA 的方法，其特征是：选取超滤浓缩25倍的狂犬病疫苗浓缩液40ml，用移液枪加入 100mmol/L的EDTA溶液4.444ml，使EDTA的终浓度为10mmol/L，摇匀后在室温下静 置40min，再使用超声波细胞粉碎机超声处理狂犬病疫苗浓缩液后，得到的超声后浓缩液 批号为S-20100205，最后通过XK50层析柱，Sepharose 4FF凝胶层析纯化，紫外检测 系统检测范围设定为0.2A，输出设定为100mV，记录仪纸速设定为2cm/h，用pH7.6的 10mmol/L PBS作流动相，收集到纯化液S-20100206。
3.按照权利要求1所述的利用超声结合EDTA溶液去除狂犬病疫苗制品中残留DNA 的方法，其特征是：选取超滤浓缩25倍的狂犬病疫苗浓缩液40ml，用移液枪加入 10mmol/L的EDTA溶液4.444ml，使EDTA的终浓度为1mmol/L，摇匀后在室温下静置 40min，再使用超声波细胞粉碎机超声处理狂犬病疫苗浓缩液后，得到的超声后浓缩液批 号为S-20100207，最后通过XK50层析柱，Sepharose 4FF凝胶层析纯化，紫外检测系 统检测范围设定为0.2A，输出设定为100mV，记录仪纸速设定为2cm/h，用pH7.6的 1mmol/L PBS作流动相，收集到纯化液S-20100208。
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