[发明专利]基于蛋白质三聚化模序的高分泌性三聚体蛋白的表达方法有效
| 申请号： | 201010133096.0 | 申请日： | 2010-03-12 |
| 公开（公告）号： | CN101948864A | 公开（公告）日： | 2011-01-19 |
| 发明（设计）人： | 凌虹;王甲业;李妍;陈文江;杨丹;程德春 | 申请（专利权）人： | 哈尔滨医科大学 |
| 主分类号： | C12N15/74 | 分类号： | C12N15/74;C12N15/79 |
| 代理公司： | 北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司 11139 | 代理人： | 孙皓晨;费碧华 |
| 地址： | 150081 黑*** | 国省代码： | 黑龙江;23 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 基于 蛋白质 三聚 化模序 分泌 三聚体 蛋白 表达 方法 | ||
1.一种高分泌性三聚体蛋白的表达方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)将tPA信号肽基因序列、目的蛋白基因序列和蛋白质三聚化模序基因序列连接在一起，得到融合基因；其中，目的蛋白的N末端与tPA信号肽相连，目的蛋白的C末端与蛋白质三聚化模序蛋白N末端相连；
(2)将步骤(1)所得到的融合基因克隆至原核或真核表达载体，构建得到融合蛋白原核或真核表达载体；
(3)利用原核或真核表达系统，体内或体外表达融合蛋白，即得。
2.按照权利要求1所述的表达方法，其特征在于，所述的蛋白质三聚化模序的氨基酸序列为SEQ ID NO：2所示。
3.按照权利要求2所述的表达方法，其特征在于，编码蛋白质三聚化模序的基因序列为SEQ ID NO：1所示。
4.按照权利要求1所述的表达方法，其特征在于，所述的tPA信号肽的氨基酸序列为SEQ ID NO：4所示。
5.按照权利要求4所述的表达方法，其特征在于，编码所述tPA信号肽的基因序列为SEQ ID NO：3所示。
6.一种重组原核或真核表达载体，其特征在于，包括：tPA信号肽基因序列和蛋白质三聚化模序基因序列。
7.按照权利要求6所述的原核或真核重组表达载体，其特征在于，所述的蛋白质三聚化模序的基因序列为SEQ ID NO：1所示。
8.按照权利要求6所述的原核或真核重组表达载体，其特征在于，所述的tPA信号肽的基因序列为SEQ ID NO：3所示。
9.权利要求6-8任何一项所述的重组原核或真核表达载体在表达三聚体蛋白中的应用。
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