[发明专利]一种用枯草芽孢杆菌提取的活性成分及其应用

权利要求书

1.一种用枯草芽孢杆菌发酵液中提取的活性成分，其特征在于活性成分经如下步骤得到：

a.生产菌株为枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis C2，该菌株已于2010年1月20日保存于中国微生物菌种保藏委员会普通微生物中心，地址：中国.北京.中关村；保藏号：CGMCC No：3586；

b.枯草芽孢杆菌的液体培养基配方为：蛋白胨5g、牛肉膏3g、NaCl 5g、琼脂15g、蒸馏水1000ml、pH7.2；

c.枯草芽孢杆菌的发酵条件为：每瓶装100-300ml液体培养基，温度25-40℃、转速为150-250rpm，摇床培养2-5天；

d.将含有菌体的发酵液在45℃下减压浓缩至原体积的十分之一，用正丁醇萃取3次，正丁醇萃取部分在45℃下减压浓缩至干，得粗浸膏；

e.将粗浸膏在硅胶H柱上，先用体积比为1-4∶1的乙酸乙酯和甲醇的混合溶剂洗脱，然后用甲醇全部冲下，将甲醇冲下部分在45℃下减压浓缩得A馏分；

f.将A馏分用C18填料分离，依次用50-70％、100％的甲醇：水洗脱，将100％甲醇洗脱部分合并，在45℃下减压浓缩得B馏分；

g.将B馏分用SephadexLH-20在甲醇下洗脱，每15秒接1滴，每瓶收集液体1ml，将11-16瓶合并，得到枯草芽孢杆菌的活性成分C。

2.权利要求1所述的用枯草芽孢杆菌提取的活性成分，其特征在于该活性成分能高效、快速地诱导哈茨木霉(T.harzianum)、尖孢镰刀菌(F.oxysporum)、少孢节丛孢(Arthrobotrys oliospora)形成厚垣孢子的代谢物，能应用于生物农药制备中。