[发明专利]用于测定高半胱氨酸的方法有效
申请号: | 201010134298.7 | 申请日: | 2004-07-09 |
公开(公告)号: | CN101900735A | 公开(公告)日: | 2010-12-01 |
发明(设计)人: | 袁崇生;A·达塔;窦超 | 申请(专利权)人: | 通用原子公司 |
主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68 |
代理公司: | 中科专利商标代理有限责任公司 11021 | 代理人: | 程金山 |
地址: | 美国加*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 测定 半胱氨酸 方法 | ||
1.一种测定样品中的高半胱氨酸(Hcy)的方法,该方法包含:
a)在Hcy转化反应中将含有或怀疑含有Hcy的样品与Hcy共底物和Hcy转化酶接触以形成Hcy转化产物和Hcy共底物转化产物,其中所述Hcy共底物是S-腺苷甲硫氨酸(SAM),所述Hcy转化酶是S-腺苷甲硫氨酸(SAM)-依赖性高半胱氨酸S-甲基转移酶,所述Hcy转化产物是甲硫氨酸(Met)并且所述Hcy共底物转化产物是S-腺苷-L-高半胱氨酸(SAH);
b)将步骤(a)中产生的所述SAH与SAH水解酶接触以产生Hcy和腺苷(Ado),所述Hcy通过SAM-依赖性高半胱氨酸S-甲基转移酶循环至所述Hcy转化反应中以形成基于Hcy共底物的酶循环反应体系,评估所述Ado以确定样品中Hcy的存在、不存在和/或数量。
2.权利要求1的方法,其中通过将所述Ado与腺苷转化酶而非SAH水解酶接触来评估Ado。
3.权利要求2的方法,其中通过评估所述腺苷转化酶的腺苷转化的共底物或反应产物来间接进行所述Ado的评估。
4.权利要求3的方法,其中所述腺苷转化酶是腺苷激酶。
5.权利要求3的方法,其中所述腺苷转化酶是腺苷脱氨酶。
6.权利要求1的方法,其中所述样品是体液或生物组织。
7.权利要求6的方法,其中所述体液选自由下列各项组成的组:尿,血液,血浆,血清,唾液,精液,粪便,痰液,脑脊髓液,泪液,粘液,和羊膜液。
8.权利要求6的方法,其中所述体液是血液。
9.权利要求8的方法,其中所述血液被进一步分成血浆或血清级分。
10.权利要求1的方法,其中在所述样品与Hcy共底物和Hcy转化酶接触之前或同时,将样品中氧化的或偶联的Hcy转化为还原型Hcy。
11.权利要求1的方法,其中在没有色谱分离的情况下评估所述Ado。
12.权利要求1的方法,其中将所述SAM加入所述样品中。
13.权利要求1的方法,其中通过SAM合酶由ATP和Met生成所述SAM。
14.权利要求1的方法,其中在没有色谱分离的情况下测定样品中的高半胱氨酸。
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