[发明专利]用于高通量核酸分析的珠子有效
申请号: | 201010135251.2 | 申请日: | 2010-02-24 |
公开(公告)号: | CN101838696A | 公开(公告)日: | 2010-09-22 |
发明(设计)人: | T·弗罗利克;D·海因德尔;A·罗斯勒 | 申请(专利权)人: | 霍夫曼-拉罗奇有限公司 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/10 |
代理公司: | 中国专利代理(香港)有限公司 72001 | 代理人: | 张萍;李连涛 |
地址: | 瑞士*** | 国省代码: | 瑞士;CH |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 通量 核酸 分析 珠子 | ||
1.珠子,包含至少两种序列特异性扩增引物,其中至少一种引物通过可诱导裂解的接头经由选自下列的官能部分而结合在所述支持物上:羧基-、醛-、叠氮-、炔基-、氨基-、巯基-、马来酰亚胺基-、磺酰烯基-、碘乙酰基-、氨基肼-、羟氨基-、以及马来酰亚胺基。
2.根据权利要求1所述的珠子,其中所述珠子由选自下列的材料构成:硅、二氧化钛、氧化铝、镧系元素氧化物、玻璃、硅酸盐、聚苯乙烯、纤维素、琼脂糖和聚酰胺。
3.根据权利要求2所述的珠子,其中所述可裂解的接头为光可裂解的接头。
4.根据权利要求1至3中任一项的珠子的文库。
5.根据权利要求4所述的文库,其特征在于,经由可裂解的接头结合至珠子的多种引物的各成员携带不同的可检测标签。
6.制备包含至少两种序列特异性引物的珠子的方法,所述珠子的特征还在于至少一种所述引物为可裂解的,所述方法包括:
-提供携带至少一种或多种官能团的固体支持物,和
-使所述一种或多种官能团与两种序列特异性引物的一种或多种反应性基团反应,
其中,可裂解的反应性部分存在于连接所述固体支持物与其官能团或其官能团之一的间隔子之一中;或所述可裂解部分存在于连接所述序列特异性引物之一与其反应性基团的间隔子之一中。
7.根据权利要求6所述的方法,包括:
-提供包含两种官能团的固体支持物,所述两种官能团各携带不同的保护基团;
-使第一官能团去保护,使所述基团与第一引物的反应性基团反应;
-使第二官能团去保护,使所述珠子的所述基团与第二引物的反应性基团反应。
8.根据权利要求7所述的方法,其中所述两种官能团经由双臂接头连接至珠子。
9.根据权利要求6所述的方法,包括:
-提供只携带一种官能团的固体支持物;
-使所述官能团去保护,使所述基团与第一和第二序列特异性引物的混合物反应,所述第一和第二引物包含相同的反应性基团,其特征在于至少一种所述引物与其反应性基团通过可裂解部分连接。
10.根据权利要求6所述的方法,包括:
-提供只携带一种官能团的珠子;
-使所述官能团去保护,使所述基团与寡核苷酸反应,所述寡核苷酸代表通过可裂解部分连接的第一和第二扩增引物。
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