[发明专利]一种卤虫卵中海藻糖含量的检测方法有效
申请号: | 201010139042.5 | 申请日: | 2010-04-06 |
公开(公告)号: | CN101793884A | 公开(公告)日: | 2010-08-04 |
发明(设计)人: | 王瑞明;马春玲;王腾飞;李丕武;徐汝意 | 申请(专利权)人: | 山东轻工业学院 |
主分类号: | G01N30/90 | 分类号: | G01N30/90;G01N1/28 |
代理公司: | 济南金迪知识产权代理有限公司 37219 | 代理人: | 赵会祥 |
地址: | 250013 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 虫卵 海藻 含量 检测 方法 | ||
1.一种卤虫卵中海藻糖含量的检测方法,包括超声破碎细胞、破碎后细胞处理、薄层层 析法检测,步骤如下:
(1)超声破碎细胞
将质量浓度为1-10%的卤虫卵水混合物,用超声细胞破碎仪处理,破碎条件为功率 200-300W,超声细胞破碎仪循环破碎20-30min,每个循环超声细胞破碎仪工作5-10s间歇 5-10s,得卤虫卵浆液;
(2)破碎后细胞处理
将经过步骤(1)制得的卤虫卵浆液在5000~10000r/min的条件下离心处理10~20min, 取上清液即为胞浆海藻糖溶液;
(3)薄层层析法检测
将经过步骤(2)得到的胞浆海藻糖溶液在层析板上点样,样品经过展开剂在层析板上展 开后,然后向层析板喷显色剂显色,将层析板干燥,得到海藻糖样品显色斑,再通过以下方 法之一测得海藻糖的浓度:
a、将海藻糖样品显色斑与海藻糖标准浓度显色斑的颜色深浅进行对比得出海藻糖的浓 度;
b、通过洗脱测定法测得海藻糖的浓度;
c、原位扫描法测得海藻糖的浓度;
然后根据公式:
计算得到卤虫卵海藻糖含量;
上述展开剂为正丁醇∶吡啶∶水按体积比4∶3∶1混合,上述显色剂为硫酸∶甲醇按体积 比1∶4混合;
上述步骤(3)中干燥条件为106℃干燥30min。
2.如权利要求1所述的卤虫卵中海藻糖含量的检测方法,其特征在于,步骤(3)中点样 的点样量为2~4uL。
3.如权利要求1所述的卤虫卵中海藻糖含量的检测方法,其特征在于,步骤(3)a方 法中,所述的海藻糖样品显色斑与海藻糖标准浓度显色斑的颜色深浅进行对比步骤如下:
制作海藻糖标准浓度梯度,得到海藻糖标准浓度颜色梯度显色斑,将海藻糖样品显色斑 颜色与海藻糖标准浓度颜色梯度显色斑进行对比获得海藻糖样品的浓度。
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