[发明专利]一种检测蛋白的方法有效
申请号: | 201010139720.8 | 申请日: | 2010-04-01 |
公开(公告)号: | CN102213692A | 公开(公告)日: | 2011-10-12 |
发明(设计)人: | 欧阳津;那娜;黄常刚;刘璐 | 申请(专利权)人: | 北京师范大学 |
主分类号: | G01N27/447 | 分类号: | G01N27/447;G01N21/64 |
代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅 |
地址: | 100875 北京市海*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 检测 蛋白 方法 | ||
1.一种检测蛋白的方法,包括如下步骤:
1)将待测蛋白进行凝胶电泳,使待测蛋白得到分离,并以条带形式或点的形式分布在凝胶上,将得到的凝胶记作带有蛋白条带或蛋白点的凝胶;
2)将所述带有蛋白条带或蛋白点的凝胶置于量子点溶液中,浸泡,所述量子点与所述带有蛋白条带或蛋白点的凝胶中的蛋白条带或蛋白点结合,得到蛋白条带-量子点结合体或蛋白点-量子点结合体,将得到的凝胶记作带有蛋白-量子点结合体的凝胶;
3)将所述带有蛋白-量子点结合体的凝胶进行凝胶成像,得到所述待测蛋白的凝胶电泳图像,即实现所述待测蛋白的检测。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述量子点溶液为如下1)、2)或3)所示:
1)所述量子点溶液是按照包括如下步骤的方法配制得到的:将所述量子点溶于水中,再调节pH值至3.6-4.4,具体为3.6、3.7或4.4,得到所述量子点溶液;所述量子点在所述量子点溶液中的浓度为0.1mM-0.3mM,具体为0.1mM、0.2mM或0.3mM;
2)所述量子点溶液由所述量子点、可溶性碱和水组成,所述量子点在所述量子点溶液中的浓度为0.2mM-0.325mM,具体为0.2mM、0.27mM或0.325mM,所述可溶性碱在所述量子点溶液中的浓度为1.8-3.0mol/L,具体为1.8mol/L、2.1mol/L或3.0mol/L;
3)所述量子点溶液由所述量子点、可溶性碱、N,N,N’,N’-四甲基乙二胺和水组成,所述量子点在所述量子点溶液中的浓度为0.2mM-0.325mM,具体为0.2mM、0.27mM或0.325mM,所述可溶性碱在所述量子点溶液中的浓度为1.8-3.0mol/L,具体为1.8mol/L、2.1mol/L或3.0mol/L,所述N,N,N’,N’-四甲基乙二胺在所述量子点溶液中的浓度为9.9mM-26.5mM,具体为9.9mM、17.9mM或26.5mM。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于:所述1)所示的量子点溶液中,是用巯基乙酸或巯基乙酸的水溶液调节pH值的,所述巯基乙酸在所述量子点溶液中的浓度为0.4%-0.6%(体积百分含量),具体为0.4%、0.5%或0.6%;
所述2)所示的量子点溶液中,所述可溶性碱为氢氧化钠或氢氧化钾;
所述3)所示的量子点溶液中,所述可溶性碱为氢氧化钠或氢氧化钾。
4.根据权利要求1、2或3所述的方法,其特征在于:所述浸泡的时间为1h-4h,具体为1h、2h或4h。
5.根据权利要求1-4中任一所述的方法,其特征在于:所述方法中,所述量子点溶液为所述1)所示,所述浸泡的时间为2h或4h;
所述量子点溶液为所述2)所示,所述浸泡的时间为1h;
所述量子点溶液为所述3)所示,所述浸泡的时间为1h。
6.根据权利要求1-5中任一所述的方法,其特征在于:所述量子点的结构如下:所述量子点由核心层和壳层组成,核心层为碲化镉,壳层为巯基乙酸,壳层通过静电作用覆盖于核心层的周围;静电作用是指巯基乙酸中带孤对电子的S与CdTe中带正电荷的Cd之间形成的静电作用;和/或,所述量子点的粒径为3-5nm;和/或,所述量子点的发射波长为520nm;和/或,所述量子点的激发波长为250nm-380nm。
7.根据权利要求1-6中任一所述的方法,其特征在于:所述量子点是按照包括如下步骤的方法得到的:
1)将0.1276g碲粉溶于10mL水中,磁搅拌,充氮气15-20min,得到溶液I;
2)向溶液I中加入0.08gNaBH4,在充氮气的条件下反应4h,得到溶液II,溶液II分上层清液和下层沉淀;
3)将0.45672gCdCl2·2.5H2O和420μL巯基乙酸加入200mL水中,搅拌,用NaOH调节pH值至9.2,在充氮气的条件下反应30min,得到溶液III;
4)将所述溶液II中上层清液加入所述溶液III中,在充氮气的条件下反应30min,得到溶液IV;
5)将溶液IV置于80度且密封条件下反应3.5h,得到所述量子点;
所述充氮气的速度为0.8L/min。
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