[发明专利]用于检测致病疫霉的引物、试剂盒及检测方法无效
| 申请号： | 201010145428.7 | 申请日： | 2010-04-13 |
| 公开（公告）号： | CN101921832A | 公开（公告）日： | 2010-12-22 |
| 发明（设计）人： | 王源超;郑小波;张正光;孟军 | 申请（专利权）人： | 南京农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/04;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京瑞盟知识产权代理有限公司 11300 | 代理人： | 孙民兴;杨惠 |
| 地址： | 210095 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 用于 检测 致病 引物 试剂盒 方法 | ||
1.一种用于检测致病疫霉的引物，其特征在于：其上游引物核苷酸序列如SEQ ID No.1所述，下游引物核苷酸序列如SEQ ID No.2所述。
2.一种检测致病疫霉的试剂盒，其特征在于：包含权利要求1所述的引物。
3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于：还包含4种dNTP，10×PCR反应缓冲液，2mM Mg2+，1％BSA和Taq酶。
4.一种利用权利要求2或3所述的试剂盒检测致病疫霉的方法，其特征在于：提取待测样品的DNA作为模板，利用所述的引物进行PCR反应，取PCR反应扩增产物进行检测，如果存在分子量约为369bp的DNA条带，则证明所检样品中含有致病疫霉。
5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：对PCR反应扩增产物的检测为凝胶电泳检测。
6.一种用于检测致病疫霉的引物，其特征在于：包括两对引物，第一对引物其上游引物核苷酸序列如SEQ ID No.1所述，下游引物核苷酸序列如SEQ ID No.2所述，第二对引物其上游引物核苷酸序列如SEQ ID No.3所述，下游引物核苷酸序列如SEQ ID No.4所述。
7.一种检测致病疫霉的试剂盒，其特征在于：包含权利要求6所述的引物。
8.根据权利要求7所述的试剂盒，其特征在于：还包含4种dNT，10×PCR反应缓冲液，2mM Mg2+，1％BSA，吐温-20和Taq酶。
9.一种利用权利要求6所述的引物检测致病疫霉的方法，其特征在于：提取待测样品的DNA作为模板，利用权利要求5所述的引物进行套式PCR反应，第一轮PCR反应的模板为提取待测样品的DNA，引物为所述的第二对引物，第二轮PCR反应的模板为第一轮PCR反应产物，引物为所述的第一对引物，取第二轮PCR反应扩增产物进行凝胶电泳，如果存在分子量约为369bp的DNA条带，则证明所检样品中含有致病疫霉。
10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于：对PCR反应扩增产物的检测为凝胶电泳检测。
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