[发明专利]鉴别PRV gE缺失疫苗株和野毒株的试剂盒无效
| 申请号： | 201010146353.4 | 申请日： | 2010-04-14 |
| 公开（公告）号： | CN101831506A | 公开（公告）日： | 2010-09-15 |
| 发明（设计）人： | 崔尚金;张超范 | 申请（专利权）人： | 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/70 | 分类号： | C12Q1/70;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京科龙寰宇知识产权代理有限责任公司 11139 | 代理人： | 孙皓晨;余光军 |
| 地址： | 150001 黑龙*** | 国省代码： | 黑龙江;23 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 鉴别 prv ge 缺失 疫苗 野毒株 试剂盒 | ||
1.一种快速检测和鉴别PRV gE缺失疫苗株和野毒株的环介导等温扩增试剂盒，其组成成分包括：等温反应混合缓冲液，DNA聚合酶，蒸馏水，引物混合物1和引物混合物2；其特征在于：所述的引物混合物1由3对引物组成，其中，第1对引物的序列分别为SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2所示，第2对引物的序列分别为SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4所示，第3对引物的序列分别为SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6所示；所述的引物混合物2由3对引物组成，其中，第1对引物的序列分别为SEQ ID NO：7和SEQ ID NO：8所示，第2对引物的序列分别为SEQ ID NO：9和SEQ ID NO：10所示，第3对引物的序列分别为SEQ ID NO：11和SEQ ID NO：12所示。
2.按照权利要求1所述的环介导等温扩增试剂盒，其特征在于：所述的引物混合物1由3对引物按照等摩尔比组成，所述的引物混合物2由3对引物按照等摩尔比组成。
3.按照权利要求1所述的环介导等温扩增试剂盒，其特征在于：所述的等温反应混合缓冲液是2×U的等温反应混合缓冲液，其包括以下组分：40mMTris-HCl、20mM KCl、20mM(NH4)2SO4、0.2％TritonX-100，5mM dNTP和5M甜菜碱。
4.按照权利要求3所述的环介导等温扩增试剂盒，其特征在于：所述的等温反应混合缓冲液还含有稳定剂或增强剂。
5.按照权利要求1所述的环介导等温扩增试剂盒，其特征在于：所述的DNA聚合酶为Bst DNA聚合酶。
6.按照权利要求1所述的环介导等温扩增试剂盒，其特征在于：还含有伪狂犬病病毒野毒的阳性对照质粒或PRV gE缺失疫苗株阳性对照质粒。
7.按照权利要求1所述的环介导等温扩增试剂盒，其特征在于，各组分的体积为：等温反应混合缓冲液的体积大于或等于25μL，DNA聚合酶的体积大于或等于2μL，蒸馏水的体积大于或等于9.0μL，引物混合物1的体积大于或等于6μL，引物混合物2的体积大于或等于6μL。
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