[发明专利]克隆鳞翅目昆虫雄性基因组的方法无效

专利信息
申请号: 201010152921.1 申请日: 2010-04-12
公开(公告)号: CN101828542A 公开(公告)日: 2010-09-15
发明(设计)人: 徐世清;袁红霞;司马杨虎;甘丽萍;季明明 申请(专利权)人: 苏州大学
主分类号: A01K67/033 分类号: A01K67/033
代理公司: 苏州创元专利商标事务所有限公司 32103 代理人: 陶海锋
地址: 215123 江苏省*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 克隆 鳞翅目 昆虫 雄性 基因组 方法
【权利要求书】:

1.一种克隆鳞翅目昆虫雄性基因组的方法,包括以下步骤:

(1)根据所用受体昆虫和供体昆虫的生物学特性,在适宜生长发育温度范围内,调节饲养开始时间和饲养及保护温度,促使供体昆虫雌雄蛾在受体昆虫雌蛾羽化前2日至羽化当日羽化;在受体昆虫雌蛹羽化前的2d~3d接受辐射,破坏卵母细胞核;

(2)采用供体昆虫雄蛾的精液对受体昆虫处女蛾进行人工授精;

(3)选择适合受体昆虫生物学特性的产卵温度和相对湿度,收集步骤(2)中人工授精处理后的雌蛾的产出卵;

(4)对步骤(3)所得产出卵进行雄核发育处理,获得雄核发育昆虫卵;

(5)按常规现有技术筛选和处理步骤(4)所得雄核发育昆虫卵,选择适合受体昆虫生物学特性的卵孵化温度、相对湿度和光照条件,进行孵化处理,实现对鳞翅目昆虫雄性基因组的克隆,即获得精子供体昆虫的G1代雄性基因组克隆体。

2.根据权利要求1所述的克隆鳞翅目昆虫雄性基因组的方法,其特征在于,采用步骤(2)中采用供体昆虫雄蛾的精液对受体昆虫处女蛾进行人工授精时,将步骤(2)中供体昆虫雄蛾的精液用精子稀释液调整至浓度为25~40万尾/μL。

3.根据权利要求1所述的克隆鳞翅目昆虫雄性基因组的方法,其特征在于,步骤(4)中所述雄核发育处理的方法为:步骤(3)中人工授精后所得产出卵,于25℃环境中经过热处理60min~120min,用37℃~40℃热处理220min~140min,获得雄核发育昆虫卵。

4.根据权利要求1所述的克隆鳞翅目昆虫雄性基因组的方法,其特征在于,步骤(5)中所述受体昆虫卵孵化处理的方法为:在20℃~30℃温度范围,70%~90%的相对湿度范围,每日0h~24h光照时间范围内,选择适合受体昆虫生物学特性的卵孵化温度、相对湿度和光照条件,保护卵直至孵化。

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