[发明专利]一种细菌群相同步培养的方法及试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体涉及一种细菌群相的同步培养方法和直接药敏试验结果解释说明和技术标准界定设置及试剂盒。

背景技术

临床细菌培养是医院里常用的一种临床细菌病原(因)学检查方法，即用人工的办法提供细菌生长所必需的营养和环境，使人体中的临床致病菌在专门的培养基中繁殖，然后根据菌落的形态，生长特性，对营养的特殊需求和指示剂的变化等生物学特点来判断细菌类别，对细菌种属做出鉴定，指导临床用药，具有很高的应用价值。

近年来，由于广泛使用抗生素，逐渐导致耐药菌株不断出现。某些严重感染依经验疗法使用抗菌药物不当导致致病菌耐药，延误治疗时机，或因盲目追求大剂量治疗而造成药物中毒。此外，长期滥用抗菌药物，往往引起菌群失调症，给临床治疗带来严重困难，特别是广泛滥用抗菌药物导致临床致病菌出现了多层次的变异，如广泛多重耐药、种群变异等及复数菌的联合致病情形。所以当机体任何一个部位有感染时，除了准确地培养出导致感染的细菌以外，还要针对这个细菌做出抗生素敏感实验，以便准确地筛选有效的抗生素，提示所需治疗时日，帮助临床医生选用最佳药物，还可以进行流行病学调查，了解耐药菌株的流行情况，为抗菌药物的社会应用提供有关参考信息。

当前临床常用的细菌培养方法，绝大部分是高选择性需氧菌类培养/或是单一细菌培养的方法，如进行单一需氧菌类(aerobe)、单一厌氧菌类(anaerobe)、单一细菌L型类(bacteria L-form)、其他细菌类的培养，然后逐一进行鉴定后进行药敏试验。

临床医学各科在理论知识和实践经验上，对临床致病菌包括需氧菌类、厌氧菌类、细菌L型类等既可单一感染致病，又能混合感染致病的现象，普遍缺乏客观真实的认识和理解。国内标准的培养方法仍然是单一病菌为主的培养方法，4类细菌分别由医师申请单独培养。因而，当碰到疑难感染病因培养时，需开具4个申请单分别独立申请。尚无全貌查找致病菌的概念，是临床细菌培养阳性检出率过低，影响细菌培养作为感染病临床达到“循证诊、治”的重要原因，临床上出现难诊、难治的感染病例，时时发生。

目前细菌培养的缺陷存在以下几点：

1、采样量大：以血样为例，每一次培养需用检材5-10毫升血液，若同时做4类细菌培养，需抽血20-40毫升，许多病人不愿接受，特别是新生儿感染病的细菌培养；

2、细菌培养报告时间周期长，7天才能出结果；药敏报告需72小时；

3、阳性检出率低，需氧菌类培养阳性检出率小于13％；

4、忽略了临床病菌群相混合感染是临床致病菌重要的客观现象，又忽略了临床致病菌不断变异的实际状态。

5、采用先培养需氧菌如无生长，再培养厌氧菌，如无生长再培养其他细菌，耽误救治时间。

发明内容

本发明针对现有细菌培养的上述缺陷，依据细菌易于混合感染及不断变异的特性，提供一种用于细菌群相同步培养的试剂盒。

本发明所述用于细菌群相同步培养的试剂盒包含：需氧菌类培养增殖液、厌氧菌类培养增殖液、细菌L型类培养增殖液、细胞内细菌类培养增殖液。

本发明所述细菌群相是指将细菌分成需氧菌类、厌氧菌类、细菌L型类、细胞内细菌类等四类，同步培养的每一类细菌即为一类细菌群相。

本发明所述需氧菌类培养增殖液是指适宜于培养需氧菌类如铜绿假单胞菌、埃希大肠杆菌、不动杆菌、葡萄球菌类等的培养液。

本发明所述厌氧菌类培养增殖液是指适宜于培养厌氧菌类如具核梭杆菌、延展消化链球菌、索形梭菌等的培养液。

本发明所述细胞内细菌类培养增殖液是指适宜于培养胞内细菌类如布鲁杆菌、伤寒杆菌、脑膜炎球菌、支原体等的培养液。

本发明所述细菌L型类培养增殖液是指适宜于培养细菌L型类如细菌不稳定L型和细菌稳定L型的培养液。

优选地，所述需氧菌类培养增殖液的制备方法为：新鲜牛肉汤1000毫升加蛋白胨10-15克、氯化钠3.5-5克加热溶解，调PH至7.2-7.8过滤至澄清，118-121℃20-30分钟灭菌备用。

优选地，所述厌氧菌类培养增殖液的制备方法为：新鲜牛肉汤1000毫升加蛋白胨10-17克、酵母浸膏3-5克、葡萄糖5-7克、可溶性淀粉1-2克、氯化钠4-5克、醋酸钠2-3克、盐酸半胱氨酸0.5-1.0克加热溶解，调PH至7.4-7.8，100-112℃20-30分钟灭菌备用。

优选地，所述细菌L型类培养增殖液的制备方法为：新鲜牛肉汤1000毫升，加入氯化钠45-50克、蛋白胨10-15克、加热溶解，调PH至7.2-7.8，过滤至澄清，118-121℃压力下20-30分钟灭菌备用。