[发明专利]4′-去甲基表鬼臼毒素衍生物及其合成方法和应用

说明书

技术领域

本发明4′-去甲基表鬼臼毒素衍生物及其合成和纯化方法，本发明还涉及该4′-去甲表鬼臼毒素衍生物在制备抗肿瘤药物中的用途，属于鬼臼类衍生物领域。

背景技术

4′-去甲基表鬼臼毒素(4′-Demethylepipodophyllotoxin)，其结构如式(I)所示，是从鬼臼类植物，如：小檗科植物桃儿七、山荷叶、八角莲等提取，

具有独特抗肿瘤活性的天然活性先导化合物，因强烈的毒副作用和生物利用度差等缺点，限制了其在临床的使用，因此，目前针对其结构修饰后的药物开发研究十分活跃。

目前众多文献和公开专利申请表明，4′-去甲基表鬼臼毒素C环4位以β构型通过碳氮键引入一个带有芳环的侧链，能够得到的抗肿瘤活性高、毒副作用低的新化合物，例如：Kamal等人(Bioorgan Med Chem2005；13(22)：6218-6225)合成了具有良好活性的C环4位β碳氮键取代芳环衍生物；Chen等人(Anticancer Res，2006，26(3A)：2149-2156)合成的具有芳氨基取代衍生物，目前已进入二期临床实验；美国专利US-07/987,765中记载了作为抗肿瘤药物开发的C环4位氨基化衍生物。迄今为止，在以上结构修饰及药物开发中，还尚未见到C环4位引入吡嗪基团的研究报道。

川芎嗪(Ligustrazine，tetramethylpyrazine)是中药川芎(伞形科植物川芎Ligusticum chuanxiong Hort.)的有效成分，其结构式如(II)所示，川芎嗪通过直接抑制肿

瘤、化疗增效与减毒作用、免疫调节达到抗肿瘤疗效；川芎嗪还具有缓解肿瘤细胞耐药性，其还可通过影响肿瘤细胞黏附与侵袭、抗凝血与抗血小板集聚作用而发挥抗肿瘤转移作用。因此，在4′-去甲基表鬼臼毒素C环4位，通过碳氮键整合自身就具有抗肿瘤作用的芳环化合物川芎嗪，有可能得到的新化合物，可以存在多种抗肿瘤作用机制，通过多途径、多靶点作用于肿瘤细胞，从而达到更好的抗肿瘤疗效。

发明内容

本发明目的之一提供一类具有良好抗肿瘤活性的4′-去甲表鬼臼毒素衍生物；

本发明目的之二是提供一种合成和纯化上述4′-去甲表鬼臼毒素衍生物的方法；

本发明目的之三是将上述4′-去甲表鬼臼毒素衍生物应用于制备成抗肿瘤药物；

本发明上述目的是通过以下技术方案来实现的：

一种具有抗肿瘤活性的4′-去甲表鬼臼毒素衍生物，其结构式为式(III)所示：

其中，式(III)化合物的酸成盐也当然包括在本发明的保护范围之内，优选的，所述的酸成盐包括盐酸盐或磷酸盐等酸成盐。

本发明将4′-去甲基表鬼臼毒素和川芎嗪通过亲核加成反应，得到具有良好抗肿瘤活性的式(III)化合物，该化合物可通过多途径、多靶点作用于肿瘤细胞，从而达到更好的抗肿瘤疗效。

本发明提供了一种合成上述式(III)化合物的方法，包括：

(1)、将4′-去甲表鬼臼毒素C环4位的羟基活化；

(2)、通过亲核加成反应，将川芎嗪、盐酸川芎嗪或磷酸川芎嗪引入到4′-去甲基表鬼臼毒素的C环4位，即得。

其中，步骤(1)中所述的4′-去甲表鬼臼毒素C环4位的羟基活化优选在以下条件下进行：将4′-去甲表鬼臼毒素溶于二氯甲烷中，再加入三乙胺和对甲基苯磺酰氯，搅拌反应，即得；其中，所述的搅拌转速优选为50-800转/分钟，更优选为600转/分钟；所述的反应温度优选为-20-50℃，更优选为20-25℃；所述的反应时间优选为1-8小时，更优选为1小时；

为了达到更好的技术效果，可以将上述反应产物在以下条件下进行纯化后作为合成4-(2，3，5，6-四甲基吡嗪-1-基)-4′-去甲表鬼臼毒素的前体：

将反应产物用去离子水冲洗两次，收集有机层再以生理盐水冲洗一次，回收有机层并用无水硫酸钠干燥过夜；将处理并干燥后反应液减压浓缩至干燥，用乙酸乙酯复溶，并以正己烷进行滴加至沉淀不溶，避光条件下过夜保存于4℃的冰箱中，将类白色沉淀真空干燥后，作为供合成4-(2，3，5，6-四甲基吡嗪-1-基)-4′-去甲表鬼臼毒素前体。

步骤(2)中，所述的亲核加成反应优选在以下条件下进行：