[发明专利]果蔗腋芽脱毒组培快繁方法无效
申请号: | 201010160577.0 | 申请日: | 2010-04-23 |
公开(公告)号: | CN101803574A | 公开(公告)日: | 2010-08-18 |
发明(设计)人: | 陈仲华;刘睿;陈月桂;杨湛端;沈万宽;谭嘉娜 | 申请(专利权)人: | 广州甘蔗糖业研究所 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 广州市红荔专利代理有限公司 44214 | 代理人: | 唐弟 |
地址: | 510316 广*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 腋芽 脱毒 组培快繁 方法 | ||
1.果蔗腋芽脱毒组培快繁的方法,包括如下步骤:
1)外植体的选取与灭菌:取果蔗的腋芽,经灭菌处理后,作为所用外植体;
2)腋芽诱导培养:将步骤1)处理后的腋芽在无菌条件下,摘取2~3mm的腋芽,接种 在腋芽诱导培养基上,诱导芽生成;
3)分化培养:将步骤2)的诱导芽移至分化培养基分化出丛芽;
4)增殖培养:将步骤3)分化形成的丛芽切成每2~3株为一组接在增殖培养基中,再 分化出丛芽;
5)生根培养:将步骤4)增殖形成的丛芽切成单株接在生根培养基中进行生根培养,长 成生根组培苗;
6)移栽:当步骤5)的生根组培苗生长至3~5cm时,将生根组培苗移栽于移栽基质培 养至成苗;
7)病菌检测:利用PCR技术对步骤6)的成苗进行RSD菌检测;
其特征在于步骤2)中采用的腋芽诱导培养基配方为:
MS+6-BA(0.5~1)mg/L+IBA(0.02~0.05)mg/L+活性炭(1~2)g/L+精氨酸(100 150)mg/L+肌醇(100~150)mg/L;
步骤3)中的分化培养基配方为:
MS+TDZ(0.001~0.01)mg/L+IBA(0.02~0.05)mg/L+蔗糖(30~40)g/L+精氨酸 (100~150)mg/L+肌醇(100~150)mg/L;
步骤4)中的增殖培养基配方为:
MS+6-BA(0.5~1.5)mg/L+IBA(0.02~0.05)mg/L+蔗糖(20~40)g/L+精氨酸(100~ 150)mg/L+肌醇(100~150)mg/L;
步骤5)中的生根培养基的配方为:
MS+IBA(0.2~0.5)mg/L+NAA(0.1~0.2)mg/L+蔗糖(30~50)g/L+多效唑(0.5~1) mg/L。
2.如权利要求1所述的果蔗脱毒组培快繁的方法,其特征在于步骤6)中的移栽基质为: 泥炭土∶珍珠岩∶蛭石=3~4∶1∶2~3。
3.如权利要求1或2所述的果蔗脱毒组培快繁的方法,其特征在于:
步骤1)中所述的灭菌处理是将外植体经75%酒精浸泡0.5~1.0min,再用0.1%汞溶 液灭菌3~4min,最后用无菌水冲洗3~5次。
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