[发明专利]环阿尔廷型三萜皂苷类化合物、制备方法及其应用

权利要求书

1.环阿尔廷型三萜皂苷类化合物的制备方法，其特征在于：

（1）粉碎选定的中药或植物原材料，然后利用闪式提取技术或溶剂提取法，采用50%-100%的乙醇或甲醇提取，减压回收提取液至醇浓度低于5%，离心后取上清液；

（2）上清液经非极性大孔树脂柱色谱处理，依次用水和醇梯度洗脱，各洗脱部位利用LC-MS技术筛选富集环阿尔廷型三萜皂苷类成分的有效部位，得到30%-100%醇洗脱下来的流分为环阿尔廷型三萜皂苷类成分的有效部位，即粗总皂苷；

（3）粗总皂苷经硅胶闪烁柱色谱法快速处理，以氯仿、甲醇、丙酮、乙酸乙酯、乙醇一些有机溶剂或混合溶剂梯度洗脱，洗脱溶剂为10：1～1：10的氯仿或二氯甲烷/甲醇或乙醇，氯仿或二氯甲烷/丙酮，乙酸乙酯/甲醇或乙醇，氯仿或二氯甲烷/乙酸乙酯，各洗脱流分利用LC-MS技术筛选富集环阿尔廷型三萜皂苷类成分的流分，混合比例5：1～1：2的流分为环阿尔廷型三萜皂苷类成分的流分；

（4）上述步骤（3）中所得流分经中低压柱色谱或开口ODS柱色谱柱进一步分离纯化，以甲醇/水或乙醇/水梯度洗脱，减压回收溶剂，所得流分经半制备或制备型HPLC色谱分离，以甲醇/水，乙腈/水或甲醇/乙腈/水为流动相洗脱，得到环阿尔廷型三萜皂苷类化合物；所述的环阿尔廷型三萜皂苷类化合物的通式为：

                                                 

式中：R₁ 为H或者OH；R₂为CH₃或者CH₂OH；R为糖基；糖基的数目为1-5个；糖的种类有葡萄糖，鼠李糖，木糖，阿拉伯糖；糖之间的连接方式有1-2位连接，1-4位连接，1-3位连接和1-6位连接。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述的环阿尔廷型三萜皂苷类化合物通过如下方法制备：

（1）粉碎选定的中药，然后利用闪式提取技术或溶剂提取法，采用50%-100%的乙醇或甲醇提取，减压回收提取液至醇浓度低于5%，提取液分别用氯仿或二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取，回收溶剂，收集得到氯仿或二氯甲烷萃取物、乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物；

（2）正丁醇萃取物经非极性大孔树脂柱色谱处理，依次用水和醇梯度洗脱，各洗脱部位利用LC-MS技术筛选富集环阿尔廷型三萜皂苷类成分的有效部位，得到30%-100%醇洗脱下来的流分为环阿尔廷型三萜皂苷类成分的有效部位，即粗总皂苷；

（3）乙酸乙酯萃取物和步骤（2）中所得粗总皂苷分别经硅胶闪烁柱色谱法快速处理，洗脱溶剂为10：1～1：10的氯仿或二氯甲烷/甲醇或乙醇，氯仿或二氯甲烷/丙酮，乙酸乙酯/甲醇或乙醇，氯仿或二氯甲烷/乙酸乙酯，各洗脱流分利用LC-MS技术筛选富集环阿尔廷型三萜皂苷类成分的流分；混合比例5：1～1：2的流分为环阿尔廷型三萜皂苷类成分的流分；

（4）上述步骤（3）中所得流分经中低压柱色谱或开口ODS柱色谱柱进一步分离纯化，以甲醇/水或乙醇/水梯度洗脱，减压回收溶剂，所得流分经制备型HPLC色谱分离，以甲醇/水，乙腈/水或甲醇/乙腈/水为流动相洗脱，得到环阿尔廷型三萜皂苷类化合物；所述的环阿尔廷型三萜皂苷通式为：

 

式中：R₁ 为H或者OH；R₂为CH₃或者CH₂OH；R为糖基；糖基的数目为1-5个；糖的种类有葡萄糖，鼠李糖，木糖，阿拉伯糖；糖之间的连接方式有1-2位连接，1-4位连接，1-3位连接和1-6位连接。

3.按照权利要求1或2所述环阿尔廷型三萜皂苷类化合物的制备方法，其特征在于：步骤（2）的醇为乙醇，其梯度洗脱浓度为10%-100%。

4.按照权利要求1或2所述环阿尔廷型三萜皂苷类化合物的制备方法，其特征在于：所述步骤（4）为步骤（3）中所得流分经中低压柱色谱或开口ODS色谱柱分离纯化，洗脱剂为甲醇/水或乙醇/水，混合溶剂比例1：5～5：1下来的流分进一步经高效液相色谱分离，流动相为甲醇/水、乙腈/水或甲醇/乙腈/水，从甲醇/水混合溶剂比例为1：5～5：1、乙腈/水混合溶剂比例为1：10～5：1、甲醇/乙腈/水混合溶剂比例为1：1：10～5：5：2的流分中得到环阿尔廷型三萜皂苷类单体化合物。

5.权利要求1或2制备的环阿尔廷型三萜皂苷类化合物在制备抗肿瘤药物中的应用，其特征在于，所述的化合物为：

。