[发明专利]一种龙脑的生物合成方法

权利要求书

1.一种龙脑的生物合成方法，其特征在于：包括生物催化剂制备、酶促水解反应、生物催化剂分离、龙脑产品分离，工艺过程如下：将菌株在发酵培养基中进行发酵，然后离心发酵液收集细胞作为生物催化剂；将制备好的生物催化剂加入到含乙酸龙脑酯的有机溶剂-缓冲盐混合体系或缓冲盐溶液中，进行酶促水解反应；酶促水解反应结束后先将生物催化剂分离；分离生物催化剂后，采用常规的分离方法将龙脑产品从反应液中与未反应的乙酸龙脑酯分离，得到龙脑产品。

2.根据权利要求1所述的龙脑的生物合成方法，其特征在于：生物催化剂制备所用的菌种为特氏克雷伯氏菌(Klebsiella planticola)。

3.根据权利要求1所述的龙脑的生物合成方法，其特征在于：生物催化剂制备所用的发酵培养基主要成分包括玉米粉、蛋白胨、淀粉、蔗糖、葡萄糖、废糖蜜、马铃薯汁、牛肉膏、KH₂PO₄、MgSO₄、NaCl、(NH₄)₂SO₄中的一种或者多种的混合物，用量分别为：玉米粉或蛋白胨5～20g/L，淀粉、蔗糖、葡萄糖、废糖蜜或马铃薯汁5～20g/L，牛肉膏1.0～5.0g/L，KH₂PO₄ 0.5～1.5g/L，MgSO₄ 0.05～0.5g/L，NaCl 0.2～2.0g/L，(NH₄)₂SO₄ 0.5～5.0g/L；生物催化剂制备的发酵条件为：25～-50℃，pH5.5～9.0，转速100～400rpm，培养时间1～3天。

4.根据权利要求1所述的龙脑的生物合成方法，其特征在于：乙酸龙脑酯酶促水解反应中有机溶剂的体积含量为0～20％。

5.根据权利要求4所述的龙脑的生物合成方法，其特征在于：乙酸龙脑酯酶促水解反应中有机溶剂的体积含量为0～10％。

6.根据权利要求1所述的龙脑的生物合成方法，其特征在于：酶促水解反应中所用的有机溶剂选自石油醚、乙醇、乙酸乙酯或正己烷中的一种。

7.根据权利要求1所述的龙脑的生物合成方法，其特征在于：酶促水解反应在摇床中进行，摇床转速为50～300rpm，乙酸龙脑酯加入量为0.01～0.5M，反应的温度为20～35℃，时间为2～7天。

8.根据权利要求1～7所述的龙脑的生物合成方法，其特征在于：酶促水解反应所用的缓冲盐为磷酸盐缓冲液或磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液，pH为6.0～8.0。

9.根据权利要求1项所述的龙脑的生物合成方法，其特征在于：分离生物催化剂是用过滤的方法。

10.根据权利要求1所述的龙脑的生物合成方法，其特征在于：龙脑产品分离选用的分离方法包括：萃取、蒸馏、重结晶、干燥或其他常规分离方法。