[发明专利]手足口病LAMP检测试剂盒及其检测方法无效

专利信息
申请号: 201010170608.0 申请日: 2010-05-10
公开(公告)号: CN102242223A 公开(公告)日: 2011-11-16
发明(设计)人: 刘代新;刘军辉;李昂 申请(专利权)人: 上海吉美生物工程有限公司
主分类号: C12Q1/70 分类号: C12Q1/70;C12Q1/68
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 200092 上海市杨*** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 手足 lamp 检测 试剂盒 及其 方法
【权利要求书】:

1.一种手足口病病原体LAMP检测试剂盒,包含以下成分

(1)病毒RNA提取试剂

病毒RNA的抽提可以采用常规的Trizol法,也可使用各生物公司生产的病毒RNA抽提试剂盒。

(2)LAMP检测反应液

①反应液Cox A16-用于检测柯萨奇病毒A16型

含有以下成分:

10x LAMP缓冲液(200mmol/L Tris-HCl,100mmol/L KCl,20mmol/LMgSO4,100mmol/L(NH4)SO4,1.0%Tritonx-100);100mmol/L MgSO4;25mmol/LdNTP;5mol/L betaine(甜菜碱);20umol/L引物CoxA16-FIP;20umol/L引物CoxA16-BIP;5umol/L引物CoxA16-F3;5umol/L引物CoxA16-B3;DEPC处理水。

其中引物序列为:

CoxA16-FIP:

5-AAGTRGGTTTCGGAGCCCCTTTTTTAGCCAAACCCAATGGTGAG-3

CoxA16-BIP:

5-TTYGCTTGGCARACTGCTACCATTTTAGGGGACTGACACTTGAGC-3

CoxA16-F3:5-ACATGCGCTTTGAYGCTGAA-3

CoxA16-B3:5-GCACTGGCTGGTGACATG-3

②反应液EV71-用于检测肠道病毒71型

10x LAMP缓冲液(200mmol/L Tris-HCl,100mmol/L KCl,20mmol/LMgSO4,100mmol/L(NH4)SO4,1.0%Tritonx-100);100mmol/LMgSO4;25mmol/LdNTP;5mol/L betaine(甜菜碱);20umol/L引物EV71-FIP;20umol/L引物EV71-BIP;5umol/L引物EV71-F3;5umol/L引物EV71-B3;DEPC处理水。

其中引物序列为:

EV71-FIP:

5-CAACTTCCCCGGTGGGTGTGTTTTCCTACATGCGCTTTGATGCA-3

EV71-BIP:

5-TATGTTTGTGCCACCTGGAGCCTTTTGGGGTTAGTGGCGGTTTG-3

EV71-F3:5-GCGCAAATGCGTAGAAAGG-3

EV71-B3:5-AGGGTCTGACAGCTTGACAA-3

③酶混合液

包括Bst DNA聚合酶(8U/ul)和AMV逆转录酶(8U/ul)

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