[发明专利]蓝莓的嫩茎段离体快速培养方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种蓝莓的嫩茎段离体快速培养方法，利用当年抽生的半木质化的嫩茎段 经消毒后诱导丛生芽，再经过培养后得到完整的试管苗，属于蓝莓培养方法技术领域。

背景技术

蓝莓是一种优质高档水果，营养丰富，经济价值高，其种苗主要靠扦插等常规方法繁 殖，繁殖率低，周期长且易带病毒，无法满足生产用种苗之需。

发明内容

本发明的目的是提供一种繁殖率高、繁殖速度快的蓝莓培养方法。

为了达到上述目的，本发明的技术方案是提供一种蓝莓的嫩茎段离体快速培养方法， 其特征在于，具体步骤为：

第一步：选取蓝莓当年萌发的半木质化的嫩茎，剪去叶片，冲洗干净，在超净工作台 上先用75vol％乙醇溶液消毒，然后用0.1vol％的洁尔敏溶液消毒，最后用0.1vol％升汞溶 液消毒，用无菌水冲洗，无菌滤纸吸干水分；

第二步，将消毒干净的蓝莓嫩茎切成1cm长的嫩茎段，接种于第一培养基中进行生芽 培养，所述第一培养基是在1/2Ms培养基的基础上添加了玉米素(Zt)和萘乙酸(NAA)， 待嫩茎段上长出1cm长的新芽后，将新芽切下，接种到第二培养基中进行丛生芽诱导，所 述第二培养基是在1/4Ms培养基的基础上添加了玉米素(Zt)、水解乳蛋白、Ms铁盐以及 1/10Ms微量元素；

第三步，将丛生芽切成单芽，接种于第三培养基中进行生根培养，所述第三培养基是 在1/2Ms培养基的基础上添加了萘乙酸和活性炭；

第四步，将生根的试管苗移入由重量比为5∶1的珍珠岩和泥炭混合而成的基质中， 浇足水后用塑料薄膜覆盖保温保湿，一周后揭开薄膜逐步炼苗，每天叶面喷水2-3次，15 天后施加肥料液，60天后将幼苗移至灌满纯泥炭的塑料穴盘，浇水后用塑料薄膜覆盖保温 保湿，经二个月培养后直接移栽至大田中。

优选地，所述第一培养基中玉米素(Zt)的浓度为3mg/L，萘乙酸(NAA)的浓度为 0.2mg/L，琼脂浓度为7g/L，蔗糖浓度为30g/L，pH值为5.8。

所述第二培养基中玉米素(Zt)的浓度为2mg/L，水解乳蛋白的浓度为500mg/L。

所述第三培养基中萘乙酸的浓度为5mg/L，活性炭的浓度为0.005mg/L。

所述第二步中生芽培养是25℃、光照强度2500LX以及光照时间12小时/天的条件下 进行。

所述第二步中丛生芽诱导是在23℃、光照强度3500LX以及光照时间12小时/天的条 件下进行。

所述第三步中生根培养是在23℃、光照强度3500LX，光照时间12小时/天的条件下 进行。

所述第四步中用到的肥料液中含有0.1wt％硝酸铵和0.1wt％磷酸二氢钾。

本发明具有繁殖率高，繁殖速度快，脱病毒及提纯复壮等优点。可以在短时期内工厂 化生产种苗，以供应栽培之用。

具体实施方式

下面结合实施例来具体说明本发明。

实施例1

MS培养基成分如下：

1/2Ms培养基是将上述大量元素和微量元素减半，其他成分不变配制得到。1/4Ms培 养基是将上述大量元素和微量元素减成上表中的1/4，其他成分不变配制得到。第二培养 基是在1/4Ms培养基的基础上加入Ms铁盐和1/10Ms微量元素，即所述培养液中大量元素 浓度为上表中的1/4，微量元素浓度为上表中的1/4+1/10，两种铁盐成分浓度为上表中的 2倍，其他成分不变。

蓝莓的嫩茎段离体快速培养方法，具体步骤如下：

第一步：选取蓝莓当年萌发的半木质化的嫩茎，剪去叶片，冲洗干净，在超净工作台 上先用75vol％乙醇溶液消毒1分钟，然后用0.1vol％的洁尔敏溶液消毒15分钟，最后用 0.1vol％升汞溶液消毒15分钟，用无菌水冲洗，无菌滤纸吸干水分；