[发明专利]利用戊二醛诱发红外荧光测定溶液蛋白质浓度的方法

权利要求书

1.利用戊二醛诱发红外荧光测定溶液蛋白质浓度的方法，其特征在于包括下述步骤：

1)将待测的未知浓度的实验组蛋白质溶液和1组至少4个已知浓度且浓度不同的标准组蛋白质溶液各0.5-2μL滴加在硝酸纤维素膜上；

2)将硝酸纤维素膜自然晾干；

3)将硝酸纤维素膜整个放入质量百分比浓度为0.1％～10％的戊二醛溶液，将溶液和硝酸纤维素膜加热至40℃～80℃，并保温5～60分钟；

4)用磷酸盐缓冲液或水或生理盐水清洗硝酸纤维素膜两次以上；

5)使用红外激光扫描成像系统，选择660nm-710nm之间任一波长激光激发，在大于激发激光波长至少40nm处检测硝酸纤维素膜上各蛋白质溶液斑点的荧光强度；

6)结合标准组已知蛋白质浓度与荧光强度绘制标准曲线，得到荧光强度I_校准与蛋白质溶液浓度N_标准的关系公式：I_标准＝a×N_标准+b，其中a为一元线性相关系数，b为截距，皆通过标准曲线计算得知；

7)根据标准曲线和实验组蛋白质溶液斑点的荧光强度I_实验计算实验组蛋白质溶液浓度N_实验，即N_实验＝(I_实验-b)/a。

2.根据权利要求1所述的利用戊二醛诱发红外荧光测定溶液蛋白质浓度的方法，其特征在于：所述的标准组蛋白质溶液中应至少有一个的蛋白质浓度大于实验组蛋白溶液浓度，并且至少有一个的蛋白质浓度小于实验组蛋白溶液浓度。

3.根据权利要求1所述的利用戊二醛诱发红外荧光测定溶液蛋白质浓度的方法，其特征在于：所述的硝酸纤维素膜大小以使各蛋白质溶液滴加在其上后形成的斑点之间不相互重叠干扰为准。

4.根据权利要求1所述的利用戊二醛诱发红外荧光测定溶液蛋白质浓度的方法，其特征在于：所述的戊二醛溶液采用水或生理盐水或磷酸盐缓冲液作为溶剂配制。