[发明专利]环介导恒温扩增检测肺炎衣原体的方法及检测试剂盒

权利要求书

1.一种环介导恒温扩增检测肺炎衣原体的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)基因提取步骤，从待检样品中提取模板DNA；

(2)环介导恒温扩增反应步骤，将上述模板DNA加入反应体系中进行扩增反应，其中所使用的引物序列如下：

F3  5-AGCCAAGCCTACTGGATC-3

B3  5-AACGAGATTGAACGCTGT-3

FIP 5-ACCACTCTGCATCGTGTAAATGTACTACTGCCGTAGATAGACC-3

BIP 5-GGCTTCATTGCCTTAAACATTTGGAGAGTTTCCTCTAATGTAACCAT-3；

(3)结果检测步骤，选择以下三种扩增产物检测方法中的任意一种进行检测：

A：将扩增产物离心目测白色沉淀来检测结果；

B：加入显色液观察反应液颜色来检测结果；

C：1.5％琼脂糖凝胶电泳，通过电泳带形分析检测结果。

2.根据权利要求1所述的环介导恒温扩增检测肺炎农原体的方法，其特征在于，上述步骤(2)中环介导恒温扩增反应条件为：

60～65℃    45～90分钟；

80～95℃    3～5分钟。

3.一种用于权利要求1所述的环介导恒温扩增检测肺炎衣原体的方法的

检测试剂盒，其特征在于，包括以下成分：

成分                浓度             加样量

扩增体系预混合物    2×              12.5μL

引物F35～1          5pmol/μL        1μL

引物B35～1          5pmol/μL        1μL

引物FIP             20～40pmol/μL   1μL

引物BIP             20～40pmol/μL   1μL

Bst DNA聚合酶       8U/μL           1μL

双蒸水                               5.5μL。

4.根据权利要求3所述的环介导恒温扩增检测肺炎衣原体的检测试剂盒，其特征在于，其中扩增体系预混合物中含有2.5μL 10×ThermoPol反应缓冲液、4μL 10mmol/L dNTP、1μL 100mmol/L硫酸镁、5μL 5mol/L甜菜碱。