[发明专利]水稻纹枯病生防菌枯草芽孢杆菌WJ-1及菌剂与应用无效
| 申请号： | 201010175797.0 | 申请日： | 2010-05-10 |
| 公开（公告）号： | CN101857848A | 公开（公告）日： | 2010-10-13 |
| 发明（设计）人： | 谢甲涛;游景茂;姜道宏;付艳苹;程家森 | 申请（专利权）人： | 华中农业大学 |
| 主分类号： | C12N1/20 | 分类号： | C12N1/20;A01N63/02;A01P3/00;C12R1/125 |
| 代理公司： | 武汉宇晨专利事务所 42001 | 代理人： | 王敏锋 |
| 地址： | 430070 湖*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 水稻 纹枯病生防菌 枯草 芽孢 杆菌 wj 应用 | ||
1.一株分离筛选的对水稻纹枯病有防治作用的生防菌株，其特征在于，该菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)WJ-1，其保藏号为CCTCC NO：M2010069。
2.包含权利要求1所述生防菌株的对水稻纹枯病具有防治作用的微生物菌剂。
3.如权利要求2所述的菌剂，其特征在于，以保藏号为CCTCC NO：M2010069的枯草芽孢杆菌WJ-1为菌株通过发酵方法生产，其步骤如下：
(1)先将保藏号为CCTCC NO：M2010069的枯草芽孢杆菌WJ-1的菌株在PDA平板上于33℃活化1d，再将单菌落接种到含有200ml PDB的三角瓶中，于180r/min下，33℃振荡培养48h，得到浓度为1.5×1010cfu/ml的枯草芽孢杆菌WJ-1的发酵菌液A；
(2)将所述的发酵菌液A于4℃，6,000r/min下离心20min，取离心后的上清液，用孔径为0.22μm的细菌过滤器过滤所述的上清液，得到不含枯草芽孢杆菌WJ-1的发酵液B，将获得的沉淀菌体备用；
(3)将沉淀菌体用无菌水洗涤3次，再用无菌水悬浮，使枯草芽孢杆菌WJ-1的浓度达到1.5×1010cfu/ml，得菌液C；
(4)向所述发酵菌液A或发酵液B或菌液C中分别加入吐温-20，使发酵菌液A或发酵液B或菌液C中的吐温-20的终浓度为0.025％，即得到菌体浓度为1.5×1010cfu/ml的枯草芽孢杆菌WJ-1发酵菌液A；不含枯草芽孢杆菌WJ-1的发酵液B；菌体浓度为1.5×1010cfu/ml的含枯草芽孢杆菌WJ-1的菌液C；
其中
所述的PDA培养基的组分及配方如下：马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂10g，补充蒸馏水至1000ml，调pH至7.0，在121℃高压蒸汽灭菌30min；
所述的PDB培养基的组分及配方如下：马铃薯200g，葡萄糖20g，补充蒸馏水至1000ml，调pH至7.0，在121℃高压蒸汽灭菌30min。
4.权利要求1所述的菌株在制备水稻纹枯病生物防治的微生物菌剂中的应用。
5.权利要求2或3所述的微生物菌剂在防治水稻纹枯病中的应用。
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