[发明专利]一种以米酒糟为原料液态发酵制备灵芝多糖的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种以米酒糟为原料液态发酵制备灵芝多糖的方法，属于发酵工程技术领域。

背景技术

我国米酒产量大，每生产1t米酒就可生产大约0.1t的湿酒糟。由于米酒糟所含蛋白质丰富，且价格低廉，目前主要用于生产饲料。但是生产饲料的能耗大，成本高，因此，很多厂家都将米酒糟当作废弃物处理，这既造成了浪费又污染了环境。米酒糟固形物含量为5-6％。米酒糟干基含蛋白质47.7％，脂肪8.7％，纤维25％，同时还含有丰富的矿物质元素，可作为灵芝液态发酵培养基。

灵芝是一种药食两用真菌，为担子菌纲、多孔菌科、灵芝属。我国古代的多部药书，如《神农本草经》，《本草纲目》中都有关于灵芝药效的记叙。主要有治疗肝病、慢性肝炎、肾炎、高血压、高血脂、神经衰弱、失眠健忘、气管炎及支气管炎、肠炎、动脉硬化、白血病、糖尿病和久病引起的体质衰弱等。近代国内外的临床实践证实灵芝多糖具有抗肿瘤、调节免疫、降低血糖等功能。近年来以灵芝多糖研制而成的抗癌抗肿瘤产品，是医学界乐意采用的热门良药之一。人工栽培灵芝一般需要三个月的时间才能收获，而且受气候的影响很大，成本也高。液态发酵法生产灵芝多糖也有较多的报道，其发酵和提取工艺也比较成熟，但是利用米酒糟这种低成本的原料生产灵芝多糖还未见报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种弥补现有技术的不足，以低成本原料米酒糟作为原料液态发酵制备灵芝多糖的方法。

本发明的技术方案如下：

(1)以米酒糟为原料液态发酵制备灵芝多糖的方法，其特征在于采用以下步骤：制备液体菌种：将活化好的灵芝菌种接入已灭菌的液体种子培养基，于28℃中培养5-6d后备用；

(2)液体发酵培养，以添加了碳源及辅助营养成份的米酒糟作为液体发酵培养基，对液体发酵培养菌灭菌后接种，摇床培养，28℃中培养6d；

(3)将步骤(2)得到的发酵后产物进行离心分离得到菌丝体和发酵液，在发酵液中加入95％乙醇，静置，离心沉淀得到灵芝多糖。

灵芝多糖具有抗肿瘤、调节免疫、降低血糖等功能，广泛用于保健食品和药品，本发明充分利用米酒糟这种低成本的原料，通过灭菌、添加碳源和维生素等营养成份，接入菌种，液态发酵生产灵芝多糖，是以米酒糟为原料可以变废为宝，既防止米酒糟污染环境，又可生产灵芝多糖，大大提高了米酒糟的价值，一举两得，符合可持续发展的效益。

具体实施方式

为更好理解本发明，下面结合实施例对本发明做进一步地详细说明，但是本发明要求保护的范围并不局限于实施例表示的范围。

实施例1

(1)种子培养：将100ml种子培养基装入500ml的三角瓶中，121℃灭菌15min，冷却至室温，然后将活化好后在斜面上长好的菌种接入种子培养基中。种子培养基为(单位为g/L)：葡萄糖20，酵母粉2，KH₂PO₄ 2，MgSO₄ 1，起始pH为自然pH；培养条件为：摇床转速为150转每分钟，28℃中培养6d。

用于生产灵芝多糖的微生物为灵芝属的菌种，例如红芝菌、赤芝菌等灵芝菌种。本例中采用由中国微生物保藏管理中心保藏，编号为CGMCC No.5.26号的菌株。

(2)液体发酵培养：将100ml液体发酵培养基装入500ml的三角瓶中，121℃灭菌15min，冷却至室温，然后将所得的种子培养液接入液体发酵培养基中，接种量为10ml，摇床培养，摇床转速为150转/分钟，28℃中培养6d。其中，液体发酵培养基为(单位为g/L)：葡萄糖16，米酒糟500，KH₂PO₄ 1，MgSO₄ 0.5；

(3)将步骤(2)得到的发酵液体进行离心分离得到菌丝体和发酵液，将所得的灵芝发酵液在10000转每分钟的条件下离心分离，在上清液中加入4倍体积的95％乙醇，静置15-20小时，在10000转每分钟的条件下离心分离，将沉淀烘干得到灵芝多糖0.23g。

实施例2

其它条件同实施例1，改变步骤(2)中的液体发酵培养基为(单位为g/L)：葡萄糖20，米酒糟500，豆粕粉2，KH₂PO₄ 1，MgSO₄ 0.5，维生素B1 0.1起始pH为自然pH。最后得到灵芝多糖0.32g。

实施例3