[发明专利]N-(2-甲基呋喃[2，3-d]嘧啶-4-基)丙烯酰胺、其制备方法及其用途

说明书

技术领域

本发明涉及生物医药领域，具体涉及一种小分子化合物——N-(2-甲基呋喃[2，3-d]嘧啶-4-基)丙烯酰胺及其制备方法，还涉及该化合物的用途，即其作为小分子核转录因子NF-κB信号通路抑制剂抑制炎症因子的表达从而达到抗炎作用的用途。

背景技术

核转录因子NF-κB是1986年由David Baltimore实验室的Ranjan在研究B细胞的发育及抗体表达基因重排过程中发现的。NF-κB被认为是一个组成型的B细胞核内特有的蛋白，其结合于κ轻链增强子序列(GGGACTTTCC)上，并调控抗体κ轻链的转录和表达。由于发现时其作为核转录因子选择性地结合于κ增强子上，并且当时只在B细胞提取物中被发现，因此将其命名为NF-κB。从NF-κB发现至今的24年间，已发现NF-κB在免疫系统中起到特别重要的作用，是一个重要的先天和获得性免疫以及炎症反应的调节因子。

在经典的NF-κB信号通路中，核转录因子NF-κB的异源二聚体p50：p65/RelA在静息细胞中以结合抑制蛋白IκBα的无活性形式存在于细胞质中。细胞在受到包括细胞因子、生长因子、细菌以及病毒产物等刺激的条件下，信号通过受体和细胞内连接蛋白的转导，最后汇集于主要由IKKα、IKKβ和NEMO组成的IKK复合物中，通过IKK复合物中主要是IKKβ的磷酸化激活，并进一步磷酸化为IκBα的Ser32和Ser36。随后磷酸化的IκBα快速被泛素化并被26S蛋白酶体所降解，最终导致NF-κB复合物p50：p65被释放而转位入细胞核，同靶向基因的DNA作用元件κB增强子序列结合从而调控基因的表达。受NF-κB调控诱导表达的基因多达四百种以上，包括：促炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6等；趋化因子IL-8等；细胞粘附分子ICAM-1等；以及酶MMP-9、iNOS、COX-2等。LPS和TNF-α是先天性免疫和炎症过程中常见的激活经典NF-κB信号通路的刺激物，而抗原通过TCR或者BCR受体激活经典NF-κB信号通路而在活化T细胞和B细胞的获得性免疫过程中发挥作用。

在一些类风湿性关节炎、多发性硬化症和炎性肠病等炎性疾病的病理生理发展过程中，由巨噬细胞、单核细胞、Th细胞等分泌的促炎因子、趋化因子等细胞因子对于细胞的浸润和组织损伤起着关键性的作用，而这些细胞因子几乎都是NF-κB调控的靶向基因，其中一些细胞因子如TNF-α、IL-1β等同时又反过来再次激活经典的NF-κB信号通路并导致级联反应的扩大。由此可见，NF-κB信号通路在炎性疾病中起着关键的作用。同时，糖皮质激素和阿司匹林等抗炎药物都陆续发现其抗炎作用机理与抑制NF-κB信号通路有关。

革兰氏阴性细菌的细胞壁成分脂多糖(LPS)是在微生物感染导致炎症的过程中常见的病原微生物分子，而且也是一种典型的激活经典NF-κB信号通路的刺激物。LPS通过血浆中的LBP蛋白和细胞膜上的CD14的帮助结合到由TLR4和MD-2组成的受体复合物后，导致MyD88和TRIF依赖的两条途径能够激活NF-κB，其中MyD88依赖的途径占主导地位。结合LPS后的TLR4受体胞质部分构象的改变导致TIRAP/MAL被招募到受体胞浆区域，并作为桥梁因子招募MyD88。MyD88进一步招募TRAF6和IRAK家族成员，导致TRAF6的寡聚化和自身泛素化后，通过招募TAB2和TAB3进一步激活TAK1。激活的TAK1然后磷酸化IKKβ，并引起下游IκBα磷酸化和降解，最终导致NF-κB的激活。

败血症(Sepsis)是一种高死亡率的急性炎症，是由于革兰氏阴性菌的感染导致细菌的脂多糖(LPS)进入血液循环系统，过度激活免疫系统并释放出大量的细胞因子，而引发一连串的全身性炎症，如低血压、凝血和抗纤溶反应，最终导致多种器官衰竭和死亡。LPS诱导的NF-κB的激活是其主要的病理学机制，其中炎症因子TNF-α的产生在病理生理中起关键性作用，TNF-α的抗体Afelimomb在临床试验中体现了一定疗效。

在炎性疾病的病理组织中均发现NF-κB的组成型激活，因此靶向NF-κB信号通路抑制剂的开发已经成为抗炎药物开发的重要策略。目前，国外至少已有三种靶向NF-κB信号通路的IKK抑制剂处于II期临床研究中，如SPC-839、PS1145、BMS-345541等。

发明内容

发明目的

本发明的一个目的是提供一种小分子化合物——N-(2-甲基呋喃[2，3-d]嘧啶-4-基)丙烯酰胺。

本发明的另一个目的是提供N-(2-甲基呋喃[2，3-d]嘧啶-4-基)丙烯酰胺的制备方法。