[发明专利]一种抗人SIRPα的单克隆抗体及其细胞株、制备方法和应用有效
申请号: | 201010185140.2 | 申请日: | 2010-05-25 |
公开(公告)号: | CN101880324A | 公开(公告)日: | 2010-11-10 |
发明(设计)人: | 王红阳;鄢和新;唐亮;刘琼 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军第二军医大学 |
主分类号: | C07K16/18 | 分类号: | C07K16/18;C12N5/20;G01N33/577;G01N15/10;A61K39/395;A61P37/02;A61P43/00;C12R1/91 |
代理公司: | 上海德昭知识产权代理有限公司 31204 | 代理人: | 丁振英 |
地址: | 20043*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 sirp 单克隆抗体 及其 细胞株 制备 方法 应用 | ||
1.一种抗人SIRPα的单克隆抗体,其特征在于该单克隆抗体由保藏号为保藏号为:CGMCC No.3801的杂交瘤细胞株产生,其识别位于SIRPα氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示的抗原表位。
2.一种杂交瘤细胞株,其保藏号为:CGMCC No.3801。
3.根据权利要求1所述的抗人SIRPα的单克隆抗体的制备方法,其特征在于该方法包括体外培养保藏号为CGMCC No.3801的杂交瘤细胞株,然后从培养液中回收抗人SIRPα的单克隆抗体。
4.根据权利要求3所述的抗人SIRPα的单克隆抗体的制备方法,其特征在于该方法为:
a)合成作为半抗原的多肽,其序列如SEQ ID NO:1所示;
b)将上述多肽与匙孔嘁血蓝蛋白偶联,作为免疫原免疫小鼠;
c)取免疫鼠的脾细胞,与小鼠骨髓瘤细胞融合;
d)经多轮筛选出与合成多肽反应阳性的细胞克隆,作为抗人SIRPα蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,该杂交瘤细胞株保藏号为:CGMCC No.3801;
e)通过在小鼠体内接种杂交瘤细胞生产腹水抗体,将腹水进行纯化,得到抗人SIRPα的单克隆抗体;或者通过体外细胞培养,分离纯化,得到抗人SIRPα的单克隆抗体。
5.根据权利要求1所述的抗人SIRPα的单克隆抗体在制备检测SIRPα的试剂中的应用。
6.根据权利要求5所述的抗人SIRPα的单克隆抗体在制备检测SIRPα的试剂中的应用,其中的检测是指流式细胞术、Western Blot和免疫组化检测。
7.根据权利要求1所述的抗人SIRPα的单克隆抗体在制备刺激人巨噬细胞TNF-α表达药物中的应用。
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