[发明专利]一种筛选鉴定粘附蛋白的方法无效
申请号: | 201010194953.8 | 申请日: | 2010-06-08 |
公开(公告)号: | CN101881751A | 公开(公告)日: | 2010-11-10 |
发明(设计)人: | 魏华;徐锋;彭珍;谭强来;徐迪;陈廷涛;熊勇华 | 申请(专利权)人: | 南昌大学 |
主分类号: | G01N27/62 | 分类号: | G01N27/62;G01N27/447 |
代理公司: | 南昌洪达专利事务所 36111 | 代理人: | 刘凌峰 |
地址: | 330000 江西省*** | 国省代码: | 江西;36 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 筛选 鉴定 粘附 蛋白 方法 | ||
1.一种筛选鉴定粘附蛋白的方法,其特征是方法步骤为:羧化表面的磁珠经碳二亚胺和硫代羟基琥珀酰亚胺处理后,与肠上皮细胞碎片共价偶联形成酰胺键,洗涤干净磁珠后,与益生菌表面蛋白溶液共孵育1h后,PBS缓冲液洗3遍,除去未粘附的表面蛋白,采用50mM、pH 2.3的甘氨酸盐酸缓冲液洗脱粘附蛋白,SDS-PAGE后质谱测序,鉴定此粘附蛋白。
2.一种权利要求1所述的一种筛选鉴定粘附蛋白的方法,其特征是方法为:将肠上皮细胞碎片经活泼酯法偶联将肠上皮细胞碎片经活泼酯法偶联至磁珠上,处理过的磁珠与致病菌蛋白样品共孵育1h后,PBS缓冲液洗3遍,除去未粘附的蛋白,采用50mM、pH 2.3的甘氨酸盐酸缓冲液洗脱粘附蛋白,SDS-PAGE后质谱测序,鉴定此粘附蛋白。
3.一种权利要求1或2所述的一种筛选鉴定粘附蛋白的方法,其特征是鉴定粘附蛋白的方法为:将肠上皮细胞碎片经活泼酯法偶联至磁珠上,处理过的磁珠与待测蛋白样品共孵育1h后,PBS缓冲液洗3遍,除去未粘附的蛋白,采用50mM、pH 2.3的甘氨酸盐酸缓冲液洗脱粘附蛋白,SDS-PAGE电泳检测。
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