[发明专利]基于量子点技术的一种非洲猪瘟检测方法

权利要求书

1.基于量子点技术的一种非洲猪瘟检测方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤一，将表面带有羧基或氨基的水溶性量子点与非洲猪瘟单克隆抗体连接，

(1)如果是表面带有羧基的水溶性量子点，则首先将量子点分散在硼酸盐缓冲溶液中，然后加入硫化二亚胺和二抗，混合，25℃下反应3小时，离心，洗涤，得到量子点标记的抗体复合物；其中，量子点∶硫化二亚胺∶二抗的摩尔比为60∶15∶1；

(2)如果是表面带有氨基的水溶性量子点，则首先将量子点分散在含有体积分数为1.25％的戊二醛的磷酸缓冲溶液中，超声使之完全分散，25℃下摇床活化反应3小时，加入抗体，在4℃下反应24小时，离心，洗涤，得到量子点标记的抗体复合物；其中，量子点∶戊二醛∶二抗的摩尔比为60∶15∶1；

步骤二，将切片标本先放入二甲苯中脱蜡2次，然后置入无水乙醇中梯度水化，水洗，过氧化氢灭活内源性过氧化氢酶，微波抗原修复，水洗后用BSA封闭，4℃反应过夜，磷酸缓冲溶液先后加入量子点标记的抗体复合物，避光条件下37℃反应30-60分钟，磷酸缓冲溶液漂洗，甘油封片；磷酸缓冲溶液替代一抗作为阴性对照，在荧光显微镜下观察样本。

2.根据权利要求1所述的基于量子点基础上的免疫组化分析检测方法，其特征是，步骤一中，所述硼酸盐缓冲溶液的PH为8.32。

3.根据权利要求1所述的基于量子点基础上的免疫组化分析检测方法，其特征是，步骤一中，所述磷酸缓冲溶液的PH为7.2。

4.根据权利要求1所述的基于量子点基础上的免疫组化分析检测方法，其特征是，步骤一中，所述表面带有羧基或氨基的水溶性量子点为InP，InAs，InCaAs，InAs/Cdse，InAs/ZnSe，InAs/InP，ZnS，CdS，HgS，ZnSe，CdSe，HgSe，PbSe，HgTe，CaAs，CdS/ZnS，CdS/Pbs，ZnS/CdS，ZnS/CdS，CdSe/CdS，CdSe/Cuse，CdSe/HgTe，CdSe/ZnSe，CdSe/HgSe，CdTe，MgS，Mgse，MgTe，CaS，Case或CaTe中的一种或几种的组合。

5.根据权利要求1所述的基于量子点基础上的免疫组化分析检测方法，其特征是，步骤一中，所述表面带有羧基或氨基的水溶性量子点，发射波长为520nm-680nm。

6.根据权利要求1所述的基于量子点基础上的免疫组化分析检测方法，其特征是，步骤二中，所述量子点标记的抗体复合物具体为，将步骤一得到的量子点标记的抗体复合物稀释200倍。